科研产出
氧氟沙星人工抗原的合成与多克隆抗体的制备
《食品科技 》 2009 北大核心
摘要：采用改进的碳二亚胺法,将半抗原氧氟沙星(OFL)与载体牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联,制备得到氧氟沙星免疫原OFL-BSA和包被原OFL-OVA。通过其紫外扫描光谱、SDS-PAGE凝胶电泳实验,表明半抗原和载体成功偶联。用OFL-BSA免疫BALB/C小鼠,间接ELISA测定多抗上清(pAb)效价,阻断ELISA鉴定其敏感性,交叉反应实验鉴定其特异性。结果表明,获得了高价、敏感、特异的pAb,这对抗氧氟沙星单克隆抗体(mAb)的制备具有重要意义。
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磺胺甲噁唑残留检测阻断ELISA试剂盒的研制
《华北农学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：在建立磺胺甲噁唑单克隆抗体(SMZmAb)杂交瘤细胞株和阻断ELISA方法的基础上,研制出SMZ残留快速检测试剂盒(SMZ-Kit),并对其性能进行了测定。结果表明,SMZ-Kit的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,相关系数R2=0.990 1,检测范围为1.0~128.0μg/L,灵敏度为0.73μg/L,半数抑制浓度(IC50)为11.5μg/L,检测限为1.0μg/L;饲料样、牛奶样的平均添加回收率为83.9%,83.3%,平均批内和批间变异系数均<15%;SMZ-Kit与磺胺嘧啶的交叉反应(CR%)为2.88%,与其他磺胺类药物无交叉反应;试剂盒在4℃可保存6个月。
关键词： 磺胺甲噁唑 单克隆抗体 阻断ELISA 快速检测试剂盒
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猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒ORF5基因的克隆与表达
《河南农业科学 》 2009 北大核心
摘要：用RT-PCR方法从河南分离的猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)变异株(HN07-1)中扩增ORF5全长基因,将其克隆至pMD19-T载体。测序结果表明,该序列与标准美洲株VR-2332同源性为89%,与我国早期分离的BJ-4株同源性为88%,与HB-1、JXAI变异株同源性为96%和99%。将该基因亚克隆到原核表达载体pGEX-6p-1后,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达。SDS-PAGE和Western-Blot结果表明,成功表达了41.5 kD的融合蛋白。
关键词： 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒 变异株 ORF5 原核表达
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三磷酸腺苷的电喷雾质谱裂解规律研究
《分析测试学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：采用电喷雾离子阱质谱仪对正负离子模式下5′-三磷酸腺苷(adenosine 5′-triphosphate,ATP)的各种离子[ATP+H]+、[ATP-nH+(n+1)Na]+(n=0～4)、[ATP-H]-的裂解规律进行了系统研究,并提出可能的裂解过程。实验发现在裂解过程中,ATP脱去γ-磷酸时,不仅是P—O键断裂,还存在三磷酸链上β-P‖O中O先夺去碱基上的氨基或核糖环上的羟基中H、N或O再亲核进攻磷引发结构重排,脱去γ-磷酸得到一系列碎片离子。利用理论计算解释了2种重排途径的可能性与碎片离子的丰度差异。
关键词： 5′-三磷酸腺苷(ATP) 电喷雾多级质谱 裂解规律 理论计算
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二氟沙星残留检测直接竞争ELISA方法的建立
《农业生物技术学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：应用分泌抗二氟沙星(DIF)单克隆抗体(DIFmAb)的杂交瘤细胞株建立直接竞争ELISA分析方法。特异性实验结果表明,与达氟沙星的交叉反应率为0.32%,与其它氟喹诺酮类药物和磺胺类药物无交叉反应,该方法对DIF的检测限可达到0.1μg/L,半数抑制浓度IC50为2.2μg/L,线性范围0.1～128.0μg/L,平均批内和批间变异系数小于15%。对牛奶和鸡肉分别添加0.4、2.0、10.0和50.0μg/LDIF标准品,平均回收率分别为89.3%和83.9%。直接竞争ELISA准确度高、重复性好、特异性强,适用于DIF残留快速检测的推广应用。
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普通小麦-簇毛麦T6VS·6AL易位染色体对小麦品质的影响
《麦类作物学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：为分析簇毛麦6VS导入小麦背景后对品质的影响,利用普通小麦-簇毛麦T6VS.6AL易位系和地方品种辉县红构建的一套小麦F8重组近交家系(RIL)群体,通过分子标记结合白粉病抗性鉴定,筛选出66个包含和94个不包含T6VS.6AL的纯合家系,并分别组成两个亚群体,于2005-2006年分别在江苏南京和河南郑州通过随机区组设计(各3个重复)进行14个品质性状差异比较。结果表明,3对高分子量麦谷蛋白基因在群体及其两个亚群体中均符合1∶1分离。方差分析发现,T6VS.6AL亚群体面粉平均吸水率、面团稳定时间、最大抗延阻力和50 mm处抗延阻力均显著高于非T6VS.6AL亚群体,揭示该易位系对这些性状表现正向效应;T6VS.6AL亚群体籽粒平均容重、面粉峰值黏度和面团弱化度显著低于非T6VS.6AL亚群体,揭示该易位系对这些性状具有负向效应,而T6VS.6AL亚群体面粉平均蛋白质含量、干面筋、湿面筋、出粉率、形成时间、拉伸面积和延伸度与非T6VS.6AL亚群体无显著差异,揭示该易位系对这些性状影响较小。
关键词： 普通小麦 重组近交家系 T6VS.6AL 小麦品质
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