科研产出
猪TTV2 ORF1基因的原核表达及多克隆抗体的制备
《江苏农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为了构建猪输血传播病毒2型(TTV2)ORF1基因部分片段的原核表达载体,进行原核表达,并利用重组蛋白质制备猪TTV2的多克隆抗体,采用PCR方法扩增出猪TTV2 ORF1基因的部分片段,将其克隆至原核表达载体pcoldI中,构建原核表达质粒pcold-g1,然后转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达。表达产物通过镍离子亲和层析柱进行纯化,用Western blot进行鉴定。将纯化的重组蛋白质免疫新西兰大白兔制备猪TTV2多克隆抗体,Western blot检测抗体特异性,间接ELISA检测抗体效价。PCR扩增获得大小为1 227 bp的片段,重组表达质粒经双酶切及测序证实构建正确;重组蛋白质分子量为5.2×104,主要以包涵体形式存在,纯化后纯度可达95%以上,具有较好的抗原性;制备的多克隆抗体特异性高,抗体效价达1∶12 800。重组蛋白质在大肠杆菌中得到了高效表达,为建立TTV2间接ELISA检测方法提供了优质的包被抗原。
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施氮水平对超高产夏玉米籽粒及植株形态学特征的影响
《植物营养与肥料学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：氮肥是夏玉米高产的先决条件,为明确不同施氮水平对超高产夏玉米(≥13500 kg/hm2)籽粒及植株形态学特征的影响,以苏玉30、苏玉20、苏玉29三个玉米品种为材料,连续4年、在6个施氮水平(0、360、405、450、495、540 kg/hm2)上,对成熟期玉米籽粒及植株的形态学特征进行了统计分析。结果表明,密植条件(82500plant/hm2)下,产量与施氮水平呈抛物线关系,三个品种均在450 kg/hm2施氮水平下产量最高,分别为13798、14531、16787 kg/hm2。适宜的施氮水平(450 kg/hm2)可显著增加穗粒重、粒长、粒宽及棒三叶叶夹角角度,增大茎秆第一、二、三节间长度及茎粗,缩短果穗位三节间(第七、八、九节间)的长度。氮肥水平对籽粒厚度影响不显著。产量和茎粗与第一、二、三节间长度分别表现为极显著、显著正相关关系,与第七节间长度分别表现为显著、极显著负相关关系,而二者与其他节间长度关系不显著。因此,育种上可选育粒长和粒宽较大的品种作为玉米超高产育种的方向;生产上可在第一、二、三、七节间伸长的关键时期,通过氮肥运筹调节其节间长度,达到"扩库、强源、畅流"的目的,最终建立玉米的超高产群体。
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枯草芽孢杆菌OKB105菌株不同培养基发酵上清液的杀线活性
《江苏农业科学 》 2014 北大核心
摘要：采用室内离体测定方法,测试枯草芽孢杆菌OKB105菌株在不同培养基(Landy、LB、λ肉汤、TY、超级肉汤、胰化蛋白胨肉汤、TYGPN、A、M63、M9)的发酵滤液中对植物寄生线虫[南方根结线虫(Meloidogyne incognita)2龄幼虫、程氏伞滑刃线虫(Bursaphelenchus chengi)、豆伞滑刃线虫(B.doui)、拟松材线虫(B.mucronatus)]的生物活性,以期获得具有较高防效的发酵培养基。结果表明:OKB105菌株的培养滤液分别处理植物寄生线虫6 h后,对南方根结线虫2龄幼虫防效较佳的发酵培养基是TYGPN、LB、LANDY、TY、胰化蛋白胨肉汤、超级肉汤等6个培养基;对豆伞滑刃线虫防效较佳的是TYGPN和TY等2个培养基;对豆伞滑刃线虫、拟松材线虫防效最佳的是TYGPN培养基;OKB105菌株TYGPN培养基发酵上清液对4种标靶线虫都具有较强的拮抗性。
关键词： 枯草芽孢杆菌 植物寄生线虫 培养基 发酵滤液 杀线活性 拮抗性
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江苏省水稻品种对水稻细菌性条斑病抗性鉴定及评价
《植物保护学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为明确江苏省水稻条斑病菌致病力分化状况和不同类型水稻品种对条斑病抗感特性,在孕穗期采用针刺接种法对徐淮稻区2007—2009年采集分离获得的45株条斑病菌进行致病力测定,根据病原菌在6个水稻鉴别品种IRBB4、IRBB5、IRBB14、IRBB21、IR24和金刚30上的抗感反应划分致病型,从中选择具有代表性的3种不同致病型条斑病菌,并鉴定了240个不同类型的水稻品种对条斑病的抗感性。根据菌株在鉴别品种上的抗感反应将供试菌株划分为8个致病型,其中优势致病型为C3致病型,所占比例为35.5%;大多数菌株与鉴别品种间表现出弱互作关系,少数菌株表现出强互作关系。粳稻品种对条斑病的抗性明显高于籼稻,但常规粳稻和杂交粳稻对强致病力菌抗性比例仅为59.8%和37.5%。表明水稻细菌性条斑病流行仍具有潜在的威胁。
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草莓新品种宁玉的花粉特性研究
《中国果树 》 2014 北大核心
摘要：为探明草莓新品种宁玉的花粉特性,以宁玉、红颜2个品种为试材,研究不同花期的花粉生活力与不同培养基成分、不同温度、不同光质对花粉生活力的影响。结果表明:2个品种在刚开花期的花粉生活力均达到最高,其中宁玉显著高于红颜,花粉萌发率分别为91.11%、72.94%;宁玉每枚花药中花粉数量显著高于红颜,畸形花粉率显著低于红颜;10%~15%蔗糖+0.10%硼酸为2个品种的最适花粉培养基;温度为25℃时2个品种花粉萌发率均达到最高;在5℃下处理8 h后宁玉花粉萌发率48.53%,而红颜仅28.08%;在45℃下处理8 h后宁玉花粉仍有少量萌发,而红颜未萌发;不同光质对2个品种的花粉生活力影响不显著。由此可见,宁玉花粉生活力高于红颜,具有更好的耐低温、耐高温性,推广价值更高。
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甘薯近缘种Ipomoea trifida (Kunth) G.Don基因组Fosmid文库构建及PCR筛选体系建立
《华北农学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为挖掘有价值的基因资源,对甘薯近缘种I.trifida的基因组文库进行了研究。通过流式细胞法测定I.trifida(2x,编号DLP4597)基因组大小为531.699 Mb。以叶片为材料采用包埋法提取基因组DNA,通过物理剪切进行基因组DNA片段化并进行末端平滑化和磷酸化处理,脉冲场电泳回收33~48 kb的DNA片段,然后连接到Fosmid载体pCC1FOS(Epicentre)上,包装转化大肠杆菌EPI300,构建了I.trifida的基因组Fosmid文库,该文库包含101 952个单克隆,保存于1 062个96孔培养板中,平均插入片段35 kb,覆盖基因组约6.7倍,理论上任意片段筛出率达到99.88%。以20个96孔板为一组构建三维PCR筛选体系,共分为53个组(第53组包含22个96孔板),每组包含1个超级池,20个板池,12个列池,8个行池,理论上最多通过93个PCR反应即可筛选到1个阳性单克隆。随机选择来自I.trifida的10个基因进行文库克隆筛选,平均阳性克隆数为8.2个,最少阳性克隆数为3个,最多为16个。
关键词： 甘薯近缘野生种 基因组 Fosmid文库 文库筛选体系
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解草啶浸种减轻丙草胺对水稻药害的机制
《江苏农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为揭示解草啶浸种减轻丙草胺对水稻药害的机制,采用生物化学方法研究解草啶浸种对水稻的谷胱甘肽巯基转移酶(GST)活性、α-淀粉酶活性、叶绿素含量和蛋白质含量的影响。结果显示:单独施用30 mg/L解草啶浸种能提高水稻GST活性,但对α-淀粉酶活性、叶绿素含量和蛋白质含量没有影响。单独施用不同剂量(56.25g/hm2、112.50 g/hm2、225.00 g/hm2)丙草胺后,低剂量丙草胺对GST活性有促进作用,高剂量丙草胺对GST活性有抑制作用;不同剂量丙草胺对α-淀粉酶活性、叶绿素含量和蛋白质含量均有抑制作用。通过30 mg/L解草啶浸种再施用不同剂量丙草胺,解草啶均能减轻丙草胺对水稻GST活性、α-淀粉酶活性、叶绿素含量和蛋白质含量的抑制作用。
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利用染色体片段代换系定位棉花抗黄萎病QTL
《棉花学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：通过陆地棉与海岛棉杂交并与陆地棉回交,获得1个染色体片段代换系苏VR043,抗江苏非落叶型黄萎病菌系BP2。分子检测表明,苏VR043兼有陆地棉苏棉8号的遗传背景和海7124的D4染色体片段。以苏VR043和苏棉8号为亲本构建包含176个单株的F2群体,通过标记分析和F2:3家系抗病鉴定,发现抗病性状与标记NAU3392连锁,p值为2.3×10-12。根据棉花D组染色体测序结果,参照置换区段的基因组序列,合成92对SSR引物;PCR扩增分析发现,有5对引物在苏棉8号和苏VR043之间表现多态性,并将抗病主效QTL定位在标记ZHX32和NAU3392之间,标记间遗传距离为3.2 c M,QTL解释表型变异64.8%。同时参照棉花D组测序结果,提取对应的置换区段序列,预测包含63个基因,基因聚类分析表明7个基因参与抗逆反应,其中1个基因与抗病相关。
对农业科技成果展示工作的思考
《江苏农业科学 》 2014 北大核心
摘要：农业科技成果展示就是把农业科技成果的内容通过一定形式呈现出来,供农业管理者、农业技术服务人员、农业企业人员和广大农民群众参观学习,以促进农业科技成果的转化应用。阐述了农业科技成果展示研究的意义,分析了展示主体、展示对象、展示形式这3个重要组成元素,指出其生物活体、季节地域、周期漫长的特性及对地点、人员、成果等条件的要求。经过广泛的调研实践,发现农业科技成果展示在组织手段、成果筛选、人员培养、机制建设、宣传力度等方面的存在问题并提出了相应的解决方法。
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