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巴西橡胶树胶乳亮氨酸氨肽酶基因克隆及表达

热带作物学报 2008 CSCD

摘要:以巴西橡胶树(Hevea Brasiliensis)无性系热研7-33-97的胶乳为材料,根据已报道的植物亮氨酸氨肽酶基因的保守序列设计简并引物,应用RACE技术克隆同源基因(HbLAP1)。用生物信息学软件(DNA-MAN,DNAStar,ScanProsite,ClustalW)对HbLAP1进行生物信息学分析,通过Northern-blot分析HbLAP1的表达。结果表明,HbLAP1的cDNA全长1 985 bp,包括1个1 581 bp的阅读框,编码526个氨基酸的蛋白质,一个105 bp的5'非编码区和一个299 bp的3'非编码区(包括16个腺苷酸尾巴);HbLAP1是一种可溶性的细胞质氨肽酶结构域,割胶显著下调HbLAP1的表达。HbLAP1可能是乳管细胞茉莉酸信号途径的负调控因子。

关键词: 巴西橡胶树 亮氨酸氨肽酶 RACE 割胶 生物信息学

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番木瓜环斑病毒海南分离株全基因组序列分析

病毒学报 2008 北大核心 CSCD

关键词: 番木瓜环斑病毒 全基因组 同源性 系统进化树

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烟草红素氧还蛋白基因NtRD1的克隆及其RNAi载体构建

热带作物学报 2008 CSCD

摘要:采用RACE(Rapid amplification of cDNA ends)技术进行烟草红素氧还蛋白基因NtRD1(Nicotiana tabacum rubredoxin1)全长cDNA的克隆,获得了全长808bp的cDNA,该cDNA具有完整的开放阅读框架,编码204个氨基酸,其中包含一个保守的红素氧还蛋白结构域。同源分析结果表明,NtRD1与其它植物已克隆的RDs具有较高的一致性。系统发育分析结果表明,NtRD1与其它物种RDs的亲缘关系由近及远依次是马铃薯、水稻、葡萄、拟南芥和藻类。根据RNAi(RNA interference)载体构建原则,成功地构建了干扰NtRD1的RNAi植物表达载体pCAMBIA1301-NtRD1-RNAi,为进一步探明该基因在烟草中的功能奠定了基础。

关键词: 烟草 RACE 全长cDNA NtRD1 RNAi

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建设国家热带香料饮料作物种质资源圃的思考

中国野生植物资源 2008 CSCD

摘要:针对热带香料饮料作物种质资源与生产发展现状,分析建立国家热带香料饮料作物种质资源圃的作用以及存在的问题,提出建设国家热带香料饮料作物种质资源圃,加快资源保护和创新利用的思路。

关键词: 热带香料饮料作物 种质资源 保护

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橡胶树树皮HbbHLH基因三端序列的克隆及表达分析

安徽农业科学 2008 北大核心 CSCD

摘要:[目的]为今后深入了解茉莉酸诱导橡胶树乳管分化的分子机理奠定基础。[方法]根据bHLH转录因子基因保守区设计引物,以橡胶树树皮RNA反转录第一链cDNA为模板,获得橡胶树树皮组织bHLH基因的EST序列,以此序列设计巢式引物,应用3′RACE技术对其三端序列进行克隆,并利用半定量RT-PCR分析该基因在茉莉酸处理后4 h、8 h、1 d、2 d、3 d的表达情况。[结果]克隆共得到1 084 bp的HbbHLH基因3端序列,序列分析发现该基因属于MYC型HLH结构域。表达分析结果显示,茉莉酸处理后,bHLH基因在8 h内表达逐渐增强,1 d、2 d时表达稳定最高,3 d时表达水平开始减弱。[结论]茉莉酸对HbbHLH基因的表达具有调控作用。

关键词: 橡胶树 茉莉酸 HbbHLH基因 克隆 表达

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棕榈油发展现状及前景

中国油脂 2008 北大核心 CSCD

摘要:棕榈油是世界油脂市场重要的油脂品种。棕榈油以其良好的氧化稳定性、相对低廉的市场价格受到食品行业的青睐。我国是世界第一大棕榈油进口国,并且对棕榈油的需求呈上升趋势。我国应在适宜种植地区扩大油棕的种植,发展我国的棕榈油产业,满足市场不断增长的需求。

关键词: 棕榈油 现状 前景

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ETR1靶向RNA干扰重组体的构建及序列分析

安徽农业科学 2008 北大核心 CSCD

摘要:[目的]构建拟南芥乙烯受体(ETR1)特异性短发夹环RNA(shRNA)真核表达载体。[方法]从ETR1基因cDNA序列上选取目标序列,设计2对引物,经PCR扩增得到正反向2个DNA片段(S5I和AI),构建含有该正反向互补重复序列DNA片段的中间载体,测序分析正确后再克隆到植物表达载体pCAMBIA1301中的Gus位置并经双酶切证实。[结果]ETR1基因S5I和AI片段被成功克隆进质粒pCAM-BIA1301中,酶切鉴定及测序分析显示,重组质粒shRNA编码序列与设计片段的序列完全一致。[结论]ETR1靶向RNA干扰重组体的成功构建,为进一步获得拟南芥乙烯受体基因的功能缺失突变体奠定良好基础。

关键词: ETR1 RNA干扰 短发夹环RNA 重组体

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蒲葵籽提取物体外抗HIV-1活性及机制的初步研究

中草药 2008 北大核心 CSCD

摘要:目的研究蒲葵籽提取物的体外抗HIV-1活性,对有活性粗提物进行初步机制研究。方法采用细胞毒性、合胞体抑制、HIV-1感染细胞保护实验和HIV-1 p24抗原测定等实验对蒲葵籽提取物体外抗HIV-1活性进行筛选和确认;采用重组HIV-1逆转录酶和蛋白酶活性抑制实验,融合阻断实验初步探讨活性粗提物的作用机制。结果蒲葵籽的醋酸乙酯(P3)提取物具有较强的体外抗HIV-1活性,P3抑制HIV-1诱导C8166细胞形成合胞体的EC50为5.64μg/mL,对C8166细胞的毒性较小,CC50大于200μg/mL,治疗指数(TI)大于35.46;P3抑制HIV-1急性感染中p24抗原表达的EC50为23.04μg/mL,抑制正常C8166细胞与慢性感染细胞H9/HIV-1 B融合的EC50为8.00μg/mL;P3在质量浓度为200μg/mL时,对HIV-1逆转录酶的抑制率为28.86%;P3抑制重组HIV-1蛋白酶活性的EC50为1.77μg/mL。结论蒲葵籽的醋酸乙酯提取物(P3)具有较强的体外抗HIV-1活性,其作用机制可能主要为阻断病毒进入和抑制HIV-1蛋白酶活性。

关键词: 蒲葵籽 提取物 抗HIV-1活性 HIV-1蛋白酶

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导入Ghabp1基因对烟草叶细胞发育的影响

西北植物学报 2008 北大核心 CSCD

摘要:将棉花生长素结合蛋白基因cDNA与CaMV35S启动子和NOS终止子融合,构建了一个新的表达载体pGABP1-121,采用农杆菌介导法转化烟草,经过分化、筛选和再生,得到了具有卡那霉素抗性的植株。抗性植株经PCR及Southern杂交检测,证明外源目的基因已经整合到烟草基因组中。扫描电镜观察发现转基因烟草与对照相比叶细胞增大,结果表明,棉花生长素结合蛋白基因的表达影响了烟草叶细胞的发育。

关键词: 棉花 生长素结合蛋白 转基因烟草 叶细胞 发育

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水分胁迫对大芒幼苗生长性状及几个生理指标的影响

安徽农业科学 2008 北大核心 CSCD

摘要:[目的]通过研究水分对大芒幼苗生长性状和几个生理指标的影响,评价大芒的抗旱性。[方法]采用盆栽方法,设置4个土壤水分梯度(对照、轻度水分胁迫、中度水分胁迫和重度水分胁迫)。[结果]水分胁迫对大芒的生长性状和生理特性影响显著。随着水分胁迫程度的加重和时间的延长,大芒的株高在整个胁迫期间持续上升,净光合速率均呈下降趋势,蒸腾速率日变化均为先升后降的趋势,相对含水量和根系活力均呈下降趋势,但都维持在较高水平。[结论]大芒具有一定的抗旱能力。

关键词: 大芒 水分胁迫 生长性状 生理指标 抗旱性

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