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巴西橡胶树低温诱导全长cDNA文库构建

热带作物学报 2008 CSCD

摘要:通过低温诱导处理巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)品系93-114幼嫩枝条和树叶,提取总RNA,并分离纯化mRNA。利用SMART技术合成橡胶树全长cDNA,经过Sfi I酶切后连接到pDNR-LIB载体中,得到全长cDNA文库。文库库容为1.4×106,重组率达到100%。挑取单菌落提取质粒并酶切鉴定,插入片断分布在0.3~2 kb之间,平均大小为1 kb左右,表明该文库质量合格,可用于全长基因的筛选。

关键词: 橡胶树 全长cDNA 文库 SMART

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Mineirao柱花草MSRA基因的克隆及其植物表达载体的构建

热带作物学报 2008 CSCD

摘要:根据抗病柱花草中的1个AFLP特异片段SG2950-1设计引物,利用RACE技术从Mineirao柱花草中克隆到一个MSRA基因;经测序比对,该序列与细胞色素氧化酶系基因有较高的相似性。构建了植物表达载体,通过冻融法将该载体质粒转入根癌农杆菌LBA4404,为进行该基因的功能分析奠定了基础。

关键词: Mineirao柱花草 MSRA基因 植物表达载体

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氮磷钾肥配施对腰果植株抗寒力的影响

生态环境 2008 北大核心 CSCD

摘要:2008年3月1日调查海南省昌江县受严重寒害的4龄腰果无性系FL30L9(34)氮磷钾肥配施试验果园,观察受寒害植株的主干树皮和各级分枝树皮保持青绿色或变褐色状。根据植株受寒害程度,分析氮磷钾肥配施对植株抗寒力的影响。测定受寒害植株的株高、冠幅,分析植株受寒害程度与植株大小的相关性。结果表明,氮磷钾肥对腰果植株抗寒力的影响顺序是磷肥>钾肥>氮肥;高氮(N650g·a-1·株-1)、中磷(P2O5200g·a-1·株-1)、中钾(K2O250g·a-1·株-1)的施肥水平,有利于提高植株抗寒力,植株受寒害程度低;植株受寒害程度分别与植株的株高、冠幅呈直线极显著负相关和显著负相关。

关键词: 腰果 寒害 植株抗寒力 氮肥 磷肥 钾肥

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尘螨变应原Der fl全序列的原核表达及生物信息学分析

四川动物 2008 北大核心 CSCD

摘要:目的 构建尘螨变应原Der fl原核表达体系,并了解其分子特征.方法 提取粉尘螨总RNA,用RT―PCR合成Der fl编码基因,将其克隆至pMD19-T载体,亚克隆至表达载体pET-28a(+),转化至大肠杆菌并刚IPTG诱导表达.用生物信息学软件对测序结果进行分析并预测其空间结构.结果从粉尘螨总RNA中扩增获得Der fl cDNA片段,成功构建了表达质粒pET-28a(+)-Der fl,Western blotting显示原核表达获得成功.测序结果提交GenBank,臀陆号为EU095368,该基因长966bp,与参考序列同源性达99.9%,推测其编码氩基酸321个,属疏水蛋白,位于细胞外,信号肽位于1~18氨基酸处.同源性分析提示Der fl和Eur ml相似率为88%,而Der fl和Derpl的相似率为77%,分子进化树中粉尘螨和梅氏嗜霉螨聚成一簇.Derfl的二级结构由α-螺旋(109aa,33.96%)、延伸链(55aa,17.13%)、β-转角(18aa,5.61%)和随机卷曲(139aa,43.30%)组成:结论 尘螨变麻原Der fl原核表达获得成功,为进一步生产重组变麻原奠定了基础.生物信息学分析表明粉尘螨和梅氏嗜霉螨的亲缘关系可能更近,而与屋尘螨关系稍远,此与现行的形态学分类系统并不符合.

关键词: 尘螨 Der fl 原核表达 生物信息学

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不同地点的三种红树共附生微生物分离及生物活性差异的研究

安徽农业科学 2008 北大核心 CSCD

摘要:[目的]探索红树共附生微生物及其生物活性在不同地点的差异。[方法]从海南文昌、广东深圳与湛江3个红树林区采集红树木榄、桐花与白骨壤3个品种的根与叶作样品,对样品分别进行微生物分离与抗金黄色葡萄球菌、抗白色念珠菌及B16细胞毒活性的测定。[结果]从18份红树样品中共分离出211株细菌、真菌和放线菌。不同采样地点的微生物组成、不同地点所分离到的菌株的生物活性差异极显著3、个品种的红树以及红树的根在3个不同地点的微生物的生物活性差异均极显著,而红树叶在3个不同地点分离到的微生物的生物活性差异不显著。[结论]该研究获得了一些具有生物活性的菌株,为通过微生物方法获得具有药物作用的化合物提供了可能性。

关键词: 红树 共附生微生物 生物活性

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马氏珠母贝EST微卫星的筛选

水产学报 2008 北大核心 CSCD

摘要:构建了马氏珠母贝的血液、足、鳃、胃、肝、心脏、外套膜、珍珠囊和感染多毛虫马氏珠母贝的血液(血感)等9个组织的cDNA文库,测序获得了6979个EST序列,从中查找到了268个重复序列,隶属于243个EST,含微卫星的EST数占EST总数的3.48%。珍珠囊cDNA文库含微卫星的序列所占比例最高,为6.16%,血感的最低,为1.65%。双碱基重复序列130个,占48.5%,(AT/AT)n类型最常见;三碱基类型的83个,占约31%,其中(AAT/ATT)n和(AAG/CTT)n较多;四碱基重复的有30个,占11.2%,(AAAT/ATTT)n占了该类型的约50%。一共能够设计151对微卫星引物,有130对可以扩增,占合成引物总数的86.09%,其中,多态性引物45对。多态性EST-SSR的筛选将为马氏珠母贝的分子遗传学研究、种质鉴定和野生资源保护等提供可靠的工具。

关键词: 马氏珠母贝 EST-SSR 分子遗传学

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新入侵害虫螺旋粉虱的田间药效试验及防效

热带作物学报 2008 CSCD

摘要:螺旋粉虱(Aleurodicus disperses Russell)是新入侵我国海南省的1种外来有害生物,对农业生产和生态环境具有较大危害性。田间防治研究结果表明:10%(质量分数,以下各农药浓度均为质量分数)联苯菊酯乳油、10%高效灭百可乳油、4.5%高效氯氰菊酯乳油等3种菊酯类杀虫剂对螺旋粉虱均表现出良好的速效性和持效性,其中又以10%高效灭百可乳油防效最高,为98.32%~100%;40%乐果乳油、30%敌百虫乳油和40%乙酰甲胺磷乳油等3种有机磷类农药的防效以40%乙酰甲胺磷乳油较好,但都低于上述3种菊酯类农药的防效;98%巴丹粉剂速效性较好,持效性较低;18%杀虫双水剂的速效性和持效性均较差。

关键词: 入侵害虫 螺旋粉虱 防治效果

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香蕉Maasr1基因表达产物的亚细胞定位

西北植物学报 2008 北大核心 CSCD

摘要:利用SSH分离香蕉果实采后差异表达基因,获得香蕉的ASR基因,并将其命名为Maasr1。对该基因与香蕉采后成熟衰老进行相关性研究,发现其在果实采后早期表达上调。通过对Maasr1基因进行生物信息学分析表明,Maasr1基因编码的蛋白可能作为转录因子定位于细胞核或细胞质中。为进一步深入研究该基因功能,构建了香蕉Maasr1基因与绿色荧光蛋白基因融合的植物表达载体pCAMBIA1304-Maasr1。利用基因枪转化法将重组载体转入洋葱表皮细胞瞬时表达,荧光显微镜检测结果表明,Maasr1基因表达产物定位在细胞核中,符合转录因子特性。

关键词: 香蕉 Maasr1基因 GFP表达载体 亚细胞定位

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巴西橡胶树HbCOI1基因5′调控序列的克隆及分析

西北植物学报 2008 北大核心 CSCD

摘要:利用GenomeWalker方法获得了巴西橡胶树HbCOI1的5′调控序列。通过分析表明,在该序列中除了含有真核生物典型的核心启动子区域(879~928 bp,TATA box存在于886 bp)外,一些与真核生物顺式调控元件相似的序列也存在其中,如在63、85和604 bp等处具有CAAT序列;在212、385和427 bp处有5′UTR Py-richstretch元件;在96 bp处有1个与茉莉酸应答相关的元件TGACG;在43 bp处存在1个与水杨酸应答相关的TCA-element;在145 bp处存在1个与抗性和胁迫应答相关的TC丰富重复序列。此外,在626、745、834和864 bp处分别有ACGTT-box、GATA-box、ARR1AT和I-box等顺式作用元件。

关键词: 巴西橡胶树 HbCOI1 5′调控序列 克隆 顺式作用元件

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一种快速、有效的香蕉枯萎病病原菌FOC4的分子检测方法

中国生物防治 2008 北大核心 CSCD

摘要:以ITS测序与SCAR分子标记相结合的香蕉病原菌FOC4分子检测方法,利用通用引物ITS1和ITS4对病原菌SF001的rDNA中ITS序列进行PCR扩增,获得560bp左右的特异条带。经Blast分析比对,确定该菌为FOC。再利用FOC4的特异引物PCL/PDL对基因组上的特征序列扩增区域(SCAR)进行PCR扩增,获得677bp的特有序列,鉴定菌株SF001是尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种。经过致病性测试,菌株SF001表现出典型4号生理小种的病理特征。

关键词: 香蕉枯萎病(尖孢镰刀菌古巴专化型) 分子检测方法

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