淡紫拟青霉丝氨酸蛋白酶基因克隆表达及抗血清的制备

蒋桂芳; 宋力; 黄俊生; 《安徽农业科学 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：[目的]探索利用大肠杆菌进行丝氨酸蛋白酶PL基因的克隆与表达及抗血清制备的方法。[方法]根据报道的PL蛋白基因序列设计1对引物,通过RT-PCR扩增获得PL基因片段,对重组载体进行构建、鉴定和序列分析,用表达的特异蛋白条带制备抗原,免疫家兔制备抗血清。[结果]通过RT-PCR扩增得到长约850 bp的PL基因片段,将其克隆到原核表达载体pET-22b(+)中,获得的重组子pET-22b-PL转化E.coliBL21(DE3),经最终浓度为1 mmol/L IPTG诱导37℃培养4 h,获得约31 kDa大小的重组蛋白。SDS-PAGE电泳分析表明,该蛋白表达量占菌体总蛋白的60%,说明该蛋白得到了高效表达。用表达的特异蛋白条带制备的免疫家兔制备抗血清,经ELISA测定效价为1/10 000。[结论]通过基因重组可获得PL基因在大肠杆菌中的高效表达蛋白,且该蛋白具有较高的免疫活性。

关键词： 淡紫拟青霉菌 PL基因 原核表达 抗血清 ELISA

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红树林植物海莲内生真菌Penicillium sp.091402化学成分的研究

韩壮; 梅文莉; 崔海滨; 林海鹏; 洪葵; 戴好富; 《中国海洋药物 》 2008 CSCD

摘要：目的对红树植物海莲内生真菌菌丝体提取物的乙酸乙酯萃取部分进行化学成分研究。方法采用硅胶柱色谱等分离手段,利用理化数据和各种波谱分析方法,结合文献对照,对海莲内生真菌penicilium sp.091402菌丝体中化学成分进行分离鉴定。结果与结论从海莲内生真菌penicilium sp.091402菌丝体乙酸乙酯萃取部分分离得到6个化合物,分别鉴定为:(3β,22E)-麦角甾-5,7,22-三烯-3-醇(1),(3β,5α,8α,22E)-5,8-过氧麦角甾-6,22-二烯-3-醇(2),(3β,5α,6α,7α,22E)-5,6-环氧走角甾-8(14),22-二烯-3,7-二醇(3),(3β,5α,6β,22E)-麦角甾-7,22-二烯-3,5,6-三醇(4),soyasapogenol B(5)和citrinin H2(6)。

关键词： 红树植物 海莲 内生真菌 菌丝体 化学成分

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超临界CO_2萃取/气相色谱—质谱联用分析糯米香茶中的挥发油

谭乐和; 尹桂豪; 章程辉; 刘红; 《热带作物学报 》 2008 CSCD

摘要：采用超临界CO2萃取糯米香茶(Teucrium manghuaense)叶片的挥发性成分,经毛细管气相色谱—质谱联用仪(GC-MS)分析,鉴定其中的43种挥发性化合物,用气相色谱峰面积归一法测定各组分的相对百分含量。结果表明,其主要成分为角鲨烯(39.4%)、亚麻酸(20.5%)、丁香酚(14.7%)、叶绿醇(7.89%)、棕榈酸(4.81%)、γ-衣兰油烯(3.36%)和4-(4,5-二甲基苯基)-哌啶(1.29%)等。本研究旨在为进一步开发利用糯米香茶资源提供科学依据。

关键词： 糯米香茶 挥发油 超临界CO2萃取 气相色谱—质谱

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芋艿残体降解物对芋艿生长、产量和品质的影响

邵雪玲; 吴良欢; 林钊沐; 庄亚其; 马建芳; 张仁杰; 《浙江农业学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：盆栽试验条件下探讨芋艿残体降解物对土壤养分、芋艿生长、产量及品质的影响。结果表明:与对照相比,添加芋艿残体处理芋艿株高和叶面积都有所增加;土壤碱解氮、速效钾、有效磷含量和土壤pH均有不同程度提高;添加芋艿残体可以提高芋艿产量15.4%~23.2%,也可提高芋艿品质,其中维生素C含量提高3.6%,淀粉含量提高8.4%,粗脂肪含量提高20.0%。添加芋艿残体可以提高土壤养分含量,促进芋艿生长,提高球茎产量和品质。

关键词： 芋艿残体 降解物 芋艿产量 芋艿品质

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橡胶树实生苗模拟胁迫下抗旱性综合评价

宫丽丹; 安锋; 林位夫; 《热带作物学报 》 2008 CSCD

摘要：在PEG模拟水分胁迫条件下,对PB86,PR107,RRIM600和GT1巴西橡胶树实生苗进行了多项生理指标的测定,利用主成分分析法和隶属函数值法对影响橡胶树抗旱性的主要生理指标和不同品系实生苗的抗旱性进行了分析评价。结果表明,与橡胶树抗旱性最密切的生理指标为:叶片相对含水量、超氧化物歧化酶活性、可溶性蛋白含量、丙二醛含量、叶片相对电导率和可溶性糖含量;4个品系橡胶树实生苗的抗旱性从强到弱的顺序为GT1>PR107>RRIM600>PB86。

关键词： 巴西橡胶树 抗旱性 综合评价

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荔枝LcVSP1基因5′调控序列的克隆及功能初步鉴定

钟廷琼; 李辉亮; 田维敏; 彭世清; 《西北植物学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：利用Genome Walker法获得了荔枝营养贮藏蛋白质Lc VSP1基因的5′调控序列,构建了含有该序列的植物表达载体并转化烟草,通过PCR和GUS染色对转化植株进行了鉴定.序列分析表明,Lc VSP1基因的5′调控序列中除含有真核生物典型的核心启动子区域和保守的TATA box序列外,还发现了一些与真核生物启动子中相似的顺式调控元件.对获得的转基因植株的GUS染色发现,在转基因植株的茎、叶柄和主叶脉呈现蓝色,表明Lc VSP1的5′调控序列可以启动GUS基因的表达,具有启动子的活性,并具有组织特异性.

关键词： 荔枝 营养贮藏蛋白质 5′调控序列 顺式调控元件

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桉树间作豆科牧草适应性筛选试验

白昌军; 虞道耿; 刘国道; 王文强; 《草地学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：研究13种豆科牧草与桉树(Eucalyptus spp.)间作的适应性筛选。结果表明:产草量以GC1581柱花草(Stylosanthes guianensis (Aubl.) Sw. cv. GC1581)最高(376.73 kg/hm2),与其他参试品种间差异极显著(P<0.01);大翼豆(Macroptilium atropurpureum (DC.) Urb.)、有钩柱花草(Stylosanthes hamata (L.) Taub. cv. Verano)和热研12号平托落花生(Arachis pintoi Krapov.et W.C. Greg.)不适合在桉树林间种植;参试品种的抗旱等级相差不大,其中以GC1581柱花草(Stylosanthes guianensis (Aubl.) Sw. cv. GC1581)最耐旱,抗旱等级为1.16;在6龄桉树林间种植豆科牧草,抗病性和抗虫性表现较好。

关键词： 桉树 热带豆科牧草 适应性

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新银合欢种子的萌发检验

谢振宇; 龙开意; 洪彩香; 《草业科学 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：通过用4个不同恒温、1个变温及用80℃热水、98%的浓硫酸不同时间分别浸种对新银合欢Leucaenaleucocephala种子进行发芽试验,研究不同处理水平和不同处理组合对新银合欢种子萌发的影响。结果表明:在不同处理水平下,新银合欢种子发芽率、发芽势的最佳温度分别为18℃16 h/28℃8 h变温和20℃恒温,发芽率、发芽势的最佳热、酸蚀处理分别为酸蚀20和45 min;在不同处理组合下,新银合欢种子发芽率、发芽势最佳处理组合均是18℃16 h/28℃8 h变温与98%浓硫酸浸种45 min的组合。

关键词： 萌发检验 新银合欢 种子

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胶孢炭疽菌T-DNA插入突变体库的构建及其分子分析

黄贵修; 薛迎春; 卢昕; 《热带作物学报 》 2008 CSCD

摘要：利用根癌农杆菌介导的T-DNA插入遗传转化体系转化杧果炭疽菌SC2菌株,共获得抗潮霉素B突变体4680个,平均每转化1.0×106个炭疽菌分生孢子可得到300～980个突变体,且潮霉素抗性在多次传代实验中得到稳定遗传。随机挑取38个突变体进行PCR检测,均可扩增出1条约1.2kb的目标谱带,说明突变体为T-DNA插入引起;进一步的Southern blot杂交分析结果表明,在随机挑选的20个突变体中,有1个(5%)为三拷贝T-DNA插入,4个(20%)为双拷贝插入,剩余的15个(75%)为单拷贝插入。

关键词： 胶孢炭疽菌 T- DNA 插入突变 PCR Southern杂交

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乌檀的组织培养

黄碧兰; 徐立; 李志英; 李克烈; 《植物生理学通讯 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：1植物名称乌檀[Nauclea officinalis(Pierre ex Pitard)Merr.et Chun],别名为黄羊木、胆木、熊胆树等。2材料类别种子。3培养条件(1)种子萌发培养基为MS;(2)增殖培养基:MS+6-BA 5.0 mg·L~(-1)(单位下同)+NAA 0.1;(3)生根培养基:MS+NAA 0.5。以上培养基均加3%蔗糖和0.6%琼脂,pH 5.8。培养温度为(25±2)

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