科研产出
橡胶树转录因子HbWRKY9的克隆与特性分析
《基因组学与应用生物学 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：通过RACE技术克隆得到一个新的橡胶树WRKY,命名为Hb WRKY9,Gen Bank登录号为JQ914653,基因全长为1 646 bp,ORF为954 bp,编码317个氨基酸。Hb WRKY9蛋白含有1个WRKY结构域和1个C2H2型锌指结构,与蓖麻(Ricinus communis)、麻疯树(Jatropha carcas)、毛果杨(Populus trichocarpa)和酿酒葡萄(Vitis vinifera)的WRKY成员一致性分别为80%、79%、70%和63%。对其启动子序列的分析表明,启动子核心区域位于翻译起始密码子上游74~123 bp处,启动子序列中包含TATA-box、CAAT-box、5'UTR Py-rich stretch、WRKY转录因子结合位点W-box、MYB结合位点MBS,以及与光响应相关的调控元件G-box和Box4,分生组织特异表达调控元件CCGTCC-box,与缺氧诱导相关的ARE元件,与高温胁迫相关的调控元件HSE,与Me JA和ABA等激素响应相关的CGTCA-motif和ABRE等顺式调控元件。实时荧光定量PCR分析表明,Hb WRKY9基因能响应低温胁迫,呈上调表达。
关键词： 橡胶树 转录因子 HbWRKY9 非生物胁迫 低温
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海口市市售新鲜蔬菜微生物污染分析
《浙江农业科学 》 2015
摘要：选取生菜、香菜、小葱、黄瓜、番茄、豆芽(苗)等6类高污染风险蔬菜,考查其细菌总数、大肠菌群、可培养的细菌种类及4类食源性致病菌(沙门氏菌、大肠杆菌O157、金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌)等指标。结果表明,供试蔬菜细菌总数和大肠菌群数均较高,分别在102~104g-1和240~1 100 g-1,且符合以下规律,香菜>生菜>小葱>豆苗>番茄>黄瓜;香菜和生菜中可培养的细菌种类存在部分差异,相似菌属包括葡萄球菌属、微小杆菌属、库特菌属、气单胞菌属、肠杆菌属、普罗威登斯菌属和柠檬酸杆菌属等条件致病菌;香菜和生菜中分别分离到1株疑似沙门氏菌和大肠杆菌O157。故生食生菜和香菜可能存在安全风险;农田土、有机肥和灌溉水中可培养的细菌种类与香菜和生菜相似,且也检测到大肠杆菌、李斯特菌和沙门氏菌。故受污染的环境样品是蔬菜中食源性致病菌的潜在污染源。
关键词： 新鲜蔬菜 微生物污染 食源性致病菌 mini-VIDAS VITEK 海口
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巴西橡胶树HbMADS4的克隆及原核表达分析
《热带作物学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为了探讨巴西橡胶树自根幼态无性系高产的分子机制,通过抑制缩减杂交获得了在巴西橡胶树自根幼态无性系和老态无性系胶乳中差异表达的基因片段。为进一步鉴定差异表达基因的功能,对相关基因进行克隆。通过RACE方法克隆一个新的橡胶树MADS-box转录因子基因(命名为Hb MADS4),Hb MADS4全长984 bp,含有633 bp的阅读框,编码230个氨基酸。推测Hb MADS4蛋白分子量为23.71 ku,等电点为7.61,在N端含有典型的MADS-box结构域。构建Hb MADS4原核表达载体p Hb MADS4,将其转化E.coli,经优化条件后,在20℃,0.1 mmol/L IPTG诱导4 h的条件下,获得Hb MADS4融合蛋白。Hb MADS4的克隆和Hb MADS4融合蛋白的获得为深入研究Hb MADS4的功能奠定基础。
关键词： 巴西橡胶树 MADS-box转录因子 原核表达 蛋白纯化
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巴西橡胶树HbMKK6基因的克隆及表达分析
《植物生理学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：促分裂原活化蛋白激酶的激酶(MAPKKs/MKKs)在植物应对逆境胁迫中发挥重要作用。本研究采用RACE和RT-PCR方法,从巴西橡胶树无性系‘热研7-33-97’的胶乳中克隆了一个MAPKK基因家族成员,命名为Hb MKK6。该基因的全长c DNA包含65 bp的5'非编码区,316 bp的3'非编码区和1 065 bp的开放阅读框,编码一个由354个氨基酸残基组成的蛋白质。该蛋白质分子量为39.91 k Da,理论等电点为5.96,含有保守的SMGQRD T(S/Txxxxx S/T)基序。实时荧光定量PCR结果表明,Hb MKK6在橡胶树的根、皮、胶乳及叶片中均有表达,其中在叶片中的表达量最高。Hb MKK6基因在橡胶树抗寒无性系‘93-114’叶片中的表达丰度显著高于不抗寒无性系‘热垦501’,而且在4℃低温下显著上调。高丰度表达Hb MKK6可能与增强橡胶树的抗寒性有关。
关键词： 巴西橡胶树 促分裂原活化蛋白激酶的激酶 抗寒 HbMKK6 基因表达
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橡胶树气刺短线割胶技术在东方93-114上的应用初报
《中国热带农业 》 2015
摘要：广东省胜利农场从2006年开始在东方93-114上进行橡胶树气刺短线割胶技术的试验示范。该项技术具有割线短,操作简单,割胶速度快等优点,能有效降低割胶工人的劳动强度,是提高割胶劳动生产率、缓解胶工短缺和增加胶工收入的有效途径。
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