科研产出
β-氨基丁酸早期诱导表达基因StWRKY5参与马铃薯晚疫病抗性
《分子植物育种 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：β-氨基丁酸(β-aminobutyric acid,BABA)诱导能够增强马铃薯对晚疫病的抗性。本研究从马铃薯中克隆了一个WRKY转录因子家族的基因St WRKY5。c DNA-AFLP表达谱研究表明,BABA(2 mmol/L)处理马铃薯6 h后该基因明显上调表达,晚疫病菌(Phytophthora infestans)接种16 h后上调表达。半定量RT-PCR检测表明水杨酸SA(10μmol/L)处理马铃薯离体叶片4 h后该基因上调表达,茉莉酸甲酯Me JA(50μmol/L)诱导12 h后开始表达,机械伤害处理24 h后,该基因表达也会增强,表明该基因参与多种生物和非生物因子的胁迫反应。通过稳定转化获得了超量表达St WRKY5的转基因马铃薯株系。采用离体叶片接种鉴定方法对转基因马铃薯株系晚疫病抗性进行了鉴定,研究结果显示接种4 d后超量表达转基因株系其病斑面积均显著小于对照,表明在马铃薯中超量表达St WRKY5提高了晚疫病抗性。
关键词： 马铃薯 β-氨基丁酸 St WRKY5 超量表达 晚疫病抗性
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六种复配剂对芒果细菌性黑斑病菌的室内抑菌效果评价
《湖北农业科学 》 2015 北大核心
摘要：为筛选出有效防治芒果细菌性黑斑病菌(Xanthomonas campestris pv.mangiferaeindicae)的复配剂,采用Horsfall法对6种复配剂进行室内增效评价。试验结果表明,硫酸链霉素与噻菌铜各配比、敌磺钠与中生菌素以1∶4、4∶1配比及噻菌铜与盐酸四环素以4∶1、3∶2、2∶3配比时有明显的增效作用;其余的组合则表现协同或拮抗作用。
关键词： 芒果细菌性黑斑病菌(Xanthomonas campestris pv.mangiferaeindicae) 复配剂 抑菌效果 评价
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番木瓜环斑病毒海南株系植物RNAi表达载体的构建
《热带作物学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为研究广谱抗环斑病毒(PRSV)海南株系转基因番木瓜育种方案,采集海南番木瓜各主要种植区的PRSV株系,以外壳蛋白(CP)、辅助成分-蛋白酶(HC-Pro)和复制酶(Nib)基因作为靶标基因,通过序列比对和运用Clustalx软件分析,得到干扰基因的保守区域和挑选出海南PRSV典型株系的代表样品。以p UCCRNAi为骨架质粒,利用代表样品的CP、NIb、Hc-Pro基因片断保守序列构建RNAi发夹结构,将发夹结构导入p CAMBIA2300-35S-OCS植物表达载体,构建出抗PRSV植物表达载体p CAMBIA2300-35S-CP-RNAi-OCS、p CAMBIA230035S-Hc-Pro-RNAi-OCS、p CAMBIA2300-35S-NIb-RNAi-OCS。实验将PRSV不同株系保守序列的分析与RNAi的高效抗病设计理念相结合,可用于创造高效、广谱抗PRSV病毒病的新种质。
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巴西橡胶树类钙调素蛋白基因HbCML27克隆与表达分析
《分子植物育种 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：类钙调素蛋白(Calmodulin-like proteins,CMLs)在植物钙信号转导中发挥重要作用。本研究采用反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)方法,从巴西橡胶树中克隆了CML基因Hb CML27。Hb CML27开放阅读框长度为450 bp,编码149个氨基酸。预测Hb CML27蛋白分子量为16.55 k D,等电点为4.10,是一个亲水蛋白。Hb CML27蛋白含有4个保守的EF-hand钙结合结构域,与其它植物CML27蛋白具有较高的同源性。实时荧光定量PCR分析表明,在巴西橡胶树叶片、花、根、树皮及胶乳等组织中均有Hb CML27基因表达,其中,表达量最低的组织是叶片,表达量最高的组织是胶乳。同健康橡胶树胶乳相比,Hb CML27在死皮橡胶树胶乳中的表达量降低。伤害、过氧化氢(H2O2)、乙烯利、茉莉酸甲酯(Me JA)、低温及干旱等处理均能上调Hb CML27的表达。这些结果表明Hb CML27可能参与了巴西橡胶树产排胶调控及响应非生物逆境胁迫。
关键词： 巴西橡胶树 类钙调素蛋白 死皮 非生物胁迫 表达分析
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香蕉MaPIP2-2基因的克隆、亚细胞定位及表达分析
《热带作物学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：水通道蛋白(AQPs)是细胞间和细胞内水分运输的主要通道,对于植物细胞的水分稳态和胁迫响应具有重要作用。本研究从香蕉中克隆了一个水通道蛋白基因Ma PIP2-2。序列分析结果表明,该基因的开放阅读框(ORF)为846 bp,编码281个氨基酸。多序列比对和进化树分析结果表明,该基因编码的蛋白与其它植物中水通道蛋白具有较高的一致性,并且与拟南芥At PIP2-2和At PIP2-3的亲缘关系最近。亚细胞定位表明该基因定位在细胞膜上。实时荧光定量PCR分析结果表明,该基因能够在转录水平响应甘露醇、低温、Na Cl胁迫和ABA信号。这些结果表明Ma PIP2-2可能参与了非生物逆境胁迫应答,为进一步研究Ma PIP2-2基因的功能鉴定了基础。
关键词： 水通道蛋白 PIP 香蕉 克隆 亚细胞定位 荧光定量PCR
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铜绿金龟子肠道链霉菌Streptomyces sp.BCa1菌体的抗菌成分研究
《热带作物学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为从昆虫来源的放线菌次级代谢产物中寻找药物先导分子,对铜绿金龟子幼虫肠道链霉菌Streptomyces sp.BCa1菌丝体化学成分进行了研究。通过活性跟踪,从其菌丝体的氯仿甲醇萃取物中分离得到主要成分1。利用高分辨质谱、一维和二维核磁波谱技术,将该主要成分1鉴定为具有双重旋转对称结构的不饱和大环内酯类抗生素阿扎霉素(elaiophylin),具有显著的抗金黄色葡萄球菌活性。该类化合物为首次从昆虫来源的放线菌中发现。
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农村集体经营性建设用地入市定价空间的经济学分析
《海南大学学报(人文社会科学版) 》 2015 CSSCI
摘要：当前政策已明确允许农村集体经营性建设用地与国有土地"同权同价"入市,其定价问题既有技术性因素,更有经济性因素。农村集体经营性建设用地存在的数量不清、结构不明等问题,与农村集体参与下建设用地市场的全国垄断竞争和区域寡头垄断性质,共同决定了农村集体经营性建设用地供应者面临的狭小定价空间。因此,必须有效规范地方政府的土地征收行为、设定合理的工业用地与商住用地比例,并完善各项入市的基础性工作,才有可能扩大农村集体经营性建设用地的定价空间,切实提高农民的土地收益。
关键词： 农村集体经营性建设用地 入市 定价空间 经济学分析
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亲水色谱-蒸发光散射检测器定量分析白坚木皮醇含量
《分析科学学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：建立白坚木皮醇(Quebrachitol)含量的亲水作用色谱-蒸发光散射检测器(ZICHILIC-ELSD)测定方法。Merck ZIC-HILIC色谱柱(150×4.6mm,5μm);以乙腈-水(体积比为70∶30)为流动相,等度洗脱,流速为1.0mL/min;蒸发光散射检测器,蒸发温度为65℃,雾化温度为50℃,高纯氮压力9.9 MPa。结果表明,白坚木皮醇浓度与其色谱峰面积积分值呈很好的线性关系,相关系数为0.9997。检测限为0.08mg/mL;相对标准偏差为0.48%;加标回收率为100.3%。该方法快速、简便、准确,适合从复杂体系中快速检测白坚木皮醇的含量。
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