科研产出
双抗虫基因对三倍体毛白杨的转化和抗虫性表达
《林业科学 》 2006 北大核心 CSCD
摘要:建立三倍体毛白杨叶片再生体系,用部分改造BtCry1Ac基因与慈菇蛋白酶抑制剂(API)基因构建的双抗虫基因表达载体,通过农杆菌介导法转化三倍体毛白杨无性系,在含卡那霉素50 mg·L-1的分化培养基上诱导产生不定芽的叶片占18 %,在生根培养基上对转基因植株做进一步筛选,获得50个转化再生株系。PCR检测表明:80 %的植株呈现阳性反应,部分株系进行Southern Blot检测,证明外源基因已经插入杨树基因组中。用Bt毒蛋白抗血清进行ELSA检测,结果表明:7个转基因株系都有Bt杀虫蛋白表达,表达量最高的株系约占叶总可溶性蛋白的0·016 1 %。用经分子生物学检测的28个转基因株系叶片进行舞毒蛾和杨扇舟蛾幼虫饲虫试验,结果表明:不同株系幼虫杀死率明显不同,有39·3 %的株系对舞毒蛾和杨扇舟蛾幼虫的致死率在80 %以上;25·0 %的株系对两种害虫的幼虫死亡率均在60 %~80 %之间;另有35·7 %的株系幼虫死亡率在50 %以下,有些株系基本未表现出抗虫性。同时具高抗虫性的转基因株系能够明显抑制存活幼虫的生长和发育。


萘乙酸(NAA)促进南瓜单性结实初探
《安徽农业科学 》 2006 北大核心 CSCD
摘要:通过用不同浓度奈乙酸(NAA)分别处理4个南瓜品种未经授粉的花柱,结果表明,不同浓度的NAA处理对座果率和平均单果重的影响差异不一致,但4个品种均在120 mg/kg的浓度处理时效果最好;4个品种各浓度处理的蛋白质含量与对照无显著性差异。


大肠杆菌不耐热肠毒素A、B亚单位基因双价植物表达载体的构建
《西北农业学报 》 2006 北大核心 CSCD
摘要:不耐热肠毒素LT是肠产毒性大肠杆菌(EnterotoxigenicE.coli,ETEC)分泌的一种热不稳定性肠毒素,由A、B两种亚单位组成的AB5型杂六聚体蛋白,是目前人们发现的最强有力的粘膜免疫原和粘膜免疫佐剂之一。本研究利用基因工程技术,从强致病菌株K88ac中,分别克隆了LTA和LTB基因,并利用高效植物表达载体pBI121、pBLG和pCAMBIA2300成功构建了带有内质网滞留信号RDEL/KDEL不耐热肠毒素A、B亚单位基因双价植物表达载体pCAMBIA2300-LTA-LTB。为研究LT全毒素在植物中的正确组装及进一步构建带有保护性抗原类全毒素嵌合植物疫苗奠定基础。
关键词: 大肠杆菌不耐热毒素LT 植物疫苗 载体构建


香蕉凝集素基因启动子的分离、序列分析及鉴定
《生物工程学报 》 2006 北大核心 CSCD
摘要:香蕉是世界上最重要的水果之一,由于香蕉果实是利用转基因方法生产重组药用蛋白或有价值的化合物的理想器官,构建能在香蕉果实中高水平表达异源蛋白质的表达载体是非常有意义的。而一个高效表达的载体,启动子则是其最重要元件之一,因此,果实特异性表达启动子的获得是香蕉作为生物反应器的前提。香蕉凝集素是一种在香蕉果实中大量存在的蛋白质,其基因被证明在果肉组织中大量表达。利用染色体步移法克隆到香蕉凝集素基因5′端上游的一段长702bp的序列,经序列测定及软件分析表明,该序列具有典型的启动子结构。此序列置换植物表达载体pBI121的CaMV35S启动子,构建植物表达载体,命名为pBIL2,该启动子下游为gus基因。利用基因枪法转化香蕉的根、叶和果实薄片,对gus基因的瞬时表达进行测定,结果表明所获得的凝集素基因启动子,只在香蕉果肉中瞬时表达,该启动子的表达具有果实特异性,并且表达量较高。


25种热带植物乙醇提取物对比哈小爪螨驱避作用
《植物保护 》 2006 北大核心 CSCD
摘要:在室内进行了25种热带植物乙醇提取物对比哈小爪螨驱避性测定,试验结果表明:测试的热带植物乙醇提取物大部分对比哈小爪螨成螨及其产卵有明显的驱避作用,24 h后有20种对比哈小爪螨成螨的驱避率高达80%以上,其中山芝麻驱避效果最好,驱避率高达97.78%;有23种对比哈小爪螨产卵的驱避率达80%以上,其中山橙、翻白叶树、山芝麻、洋金花4种提取物对比哈小爪螨的产卵驱避率达到100%。


马来酸酐接枝天然橡胶在废报纸粉填充聚氯乙烯材料中的应用
《塑料工业 》 2006 北大核心 CSCD
摘要:研究了马来酸酐接枝天然橡胶(MNR)作为改性剂,对废报纸粉(PF)填充聚氯乙烯(PVC)复合材料的力学性能和热学性能的影响。研究结果表明,MNR可以较好地改善PF与PVC基体的相容性,显著提高材料的冲击强度。当PF用量(质量份)为5份、MNR为4份时PF/PVC复合材料的综合性能最好,其拉伸强度为48.8MPa,缺口冲击强度达10.1kJ/m2,后者比改性前提高了87%。热重分析表明:PF/MNR/PVC复合材料的耐热性比纯PVC树脂有所提高。而PF/PVC复合材料的维卡软化温度随着PF填充量的增加而提高,但随着MNR的增加而略有降低。冲击断面扫描电镜分析证实MNR改善了报纸粉与基体树脂的相容性。
关键词: 马来酸酐 天然橡胶(MNR) 聚氯乙烯 废报纸粉 接枝 复合材料 改性


拟南芥抑芽基因SPS的克隆及植物表达载体的构建
《安徽农业科学 》 2006 北大核心 CSCD
摘要:通过PCR方法从拟南芥基因组DNA中克隆了SPS基因,序列分析表明,与Genebank公布的序列完全一致。然后,将该基因亚克隆到植物表达载体pBI121上,并将载体pBI121上的CaMV35S启动子替换为烟草伤诱导启动子POD,构建成植物表达载体pBISPSPOD。

