科研产出
一种优化的大白菜线粒体DNA提取方法
《华北农学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：介绍了一种快速、大量提取大白菜线粒体DNA的方法。以大白菜黄化苗为试验材料,通过加入一定量的DNaseⅠ和RNase A酶,充分消除核基因组DNA和RNA的污染。通过加入蛋白酶K和SDS,并经2步变温处理,即先在50℃条件下温育1 h,接着在37℃条件下温育1 h,有效地提高了mtDNA产出率。经凝胶电泳和PCR等检测,结果表明:mtDNA电泳条带清晰,OD260与OD280比值为1.8左右,纯度较高;利用细胞核看家基因Actin设计引物,扩增mtDNA,没有获得扩增产物,表明mtDNA中没有核基因组污染;利用大白菜CMS96胞质不育系基因orf222设计引物,扩增不育系和保持系mtDNA,仅在不育系中扩增出670 bp的片段;利用5个随机引物进行RAPD分析,在保持系和不育系中可扩增出许多产物,且呈现出丰富的多态性,充分表明提取的mtDNA可以满足后续的分子生物学试验。该方法的创新之处在于,通过2步变温处理的方法充分裂解线粒体膜,释放大量mtDNA,有效地提高了mtDNA的产量。试验中获得的最高产出率为每克大白菜黄化苗获得18.83μg mtDNA。
关键词： 大白菜 线粒体DNA 提取方法 变温处理 细胞质雄性不育
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鸡新城疫-传染性支气管炎-H9亚型禽流感三联灭活疫苗的制备及检验
《安徽农业科学 》 2011 北大核心
摘要：[目的]制备鸡新城疫-传染性支气管炎-H9亚型禽流感[ND-IB-AI(H9亚型)]三联灭活疫苗。[方法]以NDV La Sota株、IBVM41株、AIV(H9亚型)WD株为毒种,分别接种鸡胚,制备NDV、IBV及AIV(H9亚型)抗原液;采用病毒超滤系统浓缩病毒抗原液,并用甲醛溶液进行灭活;将浓缩灭活后的3种抗原液按一定比例混合(1∶1∶1),以司本80及吐温80为乳化剂,10号白油为佐剂,乳化制成ND-IB-AI(H9亚型)三联灭活疫苗;对制备的疫苗进行无菌检验和物理性状观察。[结果]共制备了3批ND-IB-AI(H9亚型)三联灭活疫苗实验室制品,经无菌检验为阴性,外观为乳白色,剂型为油包水型(W/O型),粘度6.3~6.8 s,离心和37℃放置21 d均不分层。[结论]所制备3批ND-IB-AI(H9亚型)三联灭活疫苗均无细菌污染,其物理性状均能达标。
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里西裸囊菌代谢产物对植物幼苗的影响研究(英文)
《Agricultural Science & Technology 》 2011
摘要：[目的]对里西裸囊菌代谢产物对植物幼苗影响进行研究,使该具有潜力的生防因子得到有效应用。[方法]以对根结线虫具有很强杀虫作用的里西裸囊菌为试验材料,测定代谢产物对植物活性的影响,代谢产物活性的差异和不同浓度代谢产物对植物活性的影响。[结果]里西裸囊菌代谢产物对不同植物的影响不同;不同培养基培养和不同溶剂抽提的里西裸囊菌代谢产物对植物的幼苗影响不同;不同浓度里西裸囊菌代谢产物对不同植物幼苗生长影响不同。[结论]还需进一步深入研究该里西裸囊菌代谢物在防治根结线虫时所需的浓度和使用时期。
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基于云计算的农业信息服务研究
《安徽农业科学 》 2011 北大核心
摘要：阐述了云计算的概念、相关技术及云服务的相关内容,详细论述了云计算环境下农业信息服务的模式,简单介绍云计算与农业信息服务结合的一个实践探索—农科云,并对云计算环境下农业信息服务进行了展望。
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小麦TaCRF2基因的克隆及其在烟草中的初步功能验证
《作物学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：通过RT-PCR方法从小麦cDNA中扩增获得1个锌指蛋白基因TaCRF2,该基因的cDNA长度为843bp,序列分析表明它编码1个含有280个氨基酸的蛋白质。在线软件预测该蛋白质的相对分子质量为30.97kD,等电点为7.03,且在C-末端含有1个典型的RING-H2型锌指蛋白结构域,在N-末端含有2个跨膜结构域。氨基酸序列比对发现,TaCRF2与水稻中1个RING型锌指蛋白(ABF95226)的相似度为82%。亚细胞定位分析显示,该蛋白分布在细胞核和细胞膜上。real-time RT-PCR表达特性分析显示,TaCRF2基因的表达受干旱、高盐和外源ABA的强烈诱导,低温对该基因的表达量影响不明显。初步功能验证发现过表达TaCRF2基因增强了转基因烟草对干旱和高盐胁迫的耐性。
关键词： 烟草 小麦 RING-H2型锌指蛋白 TaCRF2基因 干旱胁迫 盐胁迫
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鸭出血性卵巢炎实验感染模型的建立
《中国农业科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：【目的】建立鸭出血性卵巢炎的实验动物感染模型并对其发病特点进行观察,为疫苗研究和筛选评价抗病毒药物提供工具。【方法】以每只约104个ELD50的剂量经滴鼻、点眼和口服途径感染196日龄北京鸭后,观察鸭临床症状,于感染后5、7、9、21、28、34 d采血和剖检鸭,应用固定病毒稀释血清的方法测定血清中和抗体,取卵泡膜、肝脏、脾脏和脑组织进行病毒分离,对主要组织脏器进行病理学检查。【结果】攻毒后3、4、5d采食量均显著下降(下降80%),6d采食量恢复至约正常量的50%,11d恢复到正常水平;攻毒后3、4、5d产蛋量出现明显下降,6、7、8d鸭群未见产蛋,36d发病鸭群的产蛋率恢复到60%,39d鸭群的产蛋率达到80%。攻毒后5d 3只(3/3)鸭的卵泡膜和肝脏均可以分离到病毒,7d 2只(2/2)鸭的卵泡膜中均分离到病毒,1只鸭(1/2)脾脏和脑组织中均分离到病毒,9d 1只鸭(1/2)的卵泡膜中分离到病毒,21d和28d卵泡膜病毒分离结果均为阴性。感染鸭的卵巢变性、变形,卵泡膜充血、出血;卵巢、肝脏、脑、脾等组织和脏器均出现以网状细胞(巨噬细胞)增生为主的病理变化,表现为急性出血性卵巢炎、间质性肝炎、非化脓性脑炎、坏死性脾炎、间质性肾炎和轻度的心肌炎。感染后3周可检测出低效价的中和抗体。【结论】实验感染鸭出血性卵巢炎病毒后可引起急性出血性卵巢炎,利用产蛋北京鸭建立的鸭出血性卵巢炎模型,可用于评价抗病毒药物和疫苗的研究。
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北京郊区自然资源与社会经济信息管理平台研发与建设
《中国农学通报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：为提升北京郊区农村信息化和都市型现代农业水平,健全农村综合信息服务体系,进一步整合与开发郊区信息资源,依据郊区农业和农村现状,利用Oracle数据库、ArcSDE和3S等相关技术手段构建了北京郊区自然资源与社会经济信息管理平台;从前期准备、系统平台开发、平台测试、平台培训、平台运行与维护和数据更新角度讨论了该系统平台的研发与建设工作,阐述了平台涵盖信息内容全面、多种技术集成、数据快速更新和具有综合分析能力的主要特点,指出了建设过程中需要特别注意的数据质量、并发和权限分配的问题;实践证明,该系统平台实现了北京郊区自然资源与社会经济信息的空间一体化管理,为各级政府农业和农村管理部门决策提供了数据依据和分析工具,对北京社会主义新农村建设具有重要的意义,有一定的推广价值。
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衍生化固相微萃取在气相色谱中应用的研究进展
《安徽农业科学 》 2011 北大核心
摘要：固相微萃取技术(SPME)是20世纪90年代被提出并得到快速发展的一种灵敏、方便、快速、无溶剂、适用于液体和气体样品分析的样品前处理技术。针对强极性、难挥发的有机化合物,衍生化反应利于进一步的色谱分析。重点就固相微萃取的发展历史、衍生化反应类型及固相微萃取-气相色谱技术的应用进行了综述。
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