嗜水气单胞菌与温和气单胞菌的LAMP检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李嘉彬

作者： 李嘉彬;马艳平;柯浩;郝乐;刘振兴;马江耀;梁志凌;李玉谷

作者机构：

关键词： 环介导等温扩增技术;嗜水气单胞菌;温和气单胞菌;实时浊度法;检测

期刊名称： 南方水产科学

ISSN： 2095-0780

年卷期： 2014 年 05 期

页码： 10-18

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)分别建立嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,AH)与温和气单胞菌(A.sobria,AS)的快速检测方法。针对嗜水气单胞菌pilin基因、温和气单胞菌zipA基因设计特异性LAMP引物。在恒温条件下利用实时浊度仪对2组引物进行特异性和灵敏度试验,并以琼脂糖凝胶电泳和核酸染料颜色变化对扩增结果进行判定。结果显示,LAMP实时浊度法能够特异地检测嗜水气单胞菌和温和气单胞菌,最低检出限分别为46 fg·mL-1和320 fg·mL-1,是普通PCR方法的104倍和102倍;并能应用于已知临床样品检测。该研究建立的嗜水气单胞菌与温和气单胞菌LAMP快速检测方法具有高效、特异、灵敏的特点。

分类号： S941.4

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