大豆疫霉根腐病抗性相关基因SDR1的克隆及功能分析
文献类型: 中文期刊
第一作者: 范素杰
作者: 范素杰;吴俊江;陈晨;王欣;姜良宇;王金生;李文滨;徐鹏飞;张淑珍
作者机构:
关键词: 大豆;大豆疫霉根腐病;抗性相关基因;SDR1;遗传转化
期刊名称: 中国农业科学
ISSN: 0578-1752
年卷期: 2012 年 45 卷 11 期
页码: 2139-2146
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 【目的】获得大豆疫霉根腐病抗性相关基因,为培育大豆抗病品种提供理论依据。【方法】在以大豆抗病品种绥农10构建的受疫霉菌诱导后差异表达的cDNA消减文库的基础上,选取文库中一条与其它植物的DR1基因具有较高同源性且上调表达的EST序列。通过RT-PCR方法从绥农10中克隆该基因,并构建到植物表达载体pCAMBIA3301上,以感病品种东农50的子叶节为外植体通过根癌农杆菌介导的方法进行大豆遗传转化。【结果】该基因全长805 bp,开放读码框为471 bp,编码156个氨基酸,在此命名为SDR1。遗传转化获得转基因PCR鉴定阳性植株5株,Real-time PCR检测T1转基因植株较非转基因植株SDR1表达量提高20倍以上的有3株,经Southern杂交分析表明,出现杂交信号的有3株。经离体叶片接种大豆疫霉菌,转基因大豆的抗性较非转基因大豆明显提高。【结论】成功克隆了大豆疫霉根腐病抗性相关基因SDR1,并通过对过量表达的大豆转基因植株的抗病性鉴定初步确定了SDR1的抗病功能。
分类号: S435.651
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