水貂细小病毒单克隆抗体的制备及纯化方法的优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 牛登云

作者： 牛登云;张蕾;刘昊;孙彦刚;陈冠华

作者机构：

关键词： 水貂细小病毒;单克隆抗体;亲和层析;纯化

期刊名称： 黑龙江畜牧兽医

ISSN： 1004-7034

年卷期： 2014 年 23 期

页码： 17-20+24+257

收录情况： 北大核心

摘要： 为了制备并筛选出效价及特异性都较高的水貂细小病毒单克隆抗体,建立一种高纯度、高回收率的水貂细小病毒单克隆抗体的纯化方法,试验将获得的3株稳定分泌水貂细小病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为G2a-C9、M-C1、M-A5,通过HI、ELISA、Western-blot、间接免疫荧光等方法对这3株单克隆抗体进行生物学特性鉴定,再分别采用辛酸-硫酸铵沉淀和Protein A亲和层析两种方法对其纯化,并对Protein A亲和层析法进行了优化。结果表明:经生物学特性鉴定后筛选到1株效价与生物学活性都较高的Ig G2a类单克隆抗体G2a-C9,经Protein A亲和层析方法纯化后抗体纯度为90%,回收率为58%;辛酸-硫酸铵沉淀后的抗体纯度仅为80%,回收率为45%。纯化方法优化后,抗体纯度为95%,回收率为65%。说明制备的G2a-C9水貂细胞病毒单克隆抗体可用于后续产品的研发;经试验验证低温无水乙醇沉淀-Protein A亲和层析可用于Ig G2a类抗体纯化。

分类号： S858.92

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