J亚群禽白血病病毒gp85基因的原核表达及间接ELISA方法建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘丽娜

作者： 刘丽娜;邵华斌;程国富;杨峻;张琳;谢华丽;栗绍文;罗青平

作者机构：

关键词： J亚群禽白血病;gp85基因;蛋白表达;酶联免疫吸附试验

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2014 年 36 卷 01 期

页码： 38-41

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立检测J亚群禽白血病病毒(ALV-J)抗体间接ELISA方法,本实验根据已发表的ALV-J gp85基因序列设计一对特异性引物,以该病毒cDNA为模板进行PCR扩增,将目的基因克隆于pET-28a(+)载体中,原核表达的重组蛋白约为38 ku,经western blot分析表明,重组蛋白gp85具有良好的反应原性。以纯化的重组蛋白作为包被抗原建立了间接ELISA抗体检测方法,该方法对其它相关的禽类病原无交叉反应,其组内和组间的变异系数均低于13%,具有良好的重复性。对458份临床血清样品进行检测,同时用IDEXX的同类ELISA抗体检测试剂盒进行对比,总符合率达到96.29%。本研究为ALV-J的流行病学调查提供了一种简便的血清学诊断方法。

分类号： S852.65

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