文献类型： 中文期刊
第一作者： 王路
作者： 王路;刘光远;谢俊仁;龚真莉;田占成;柴慧萍;贾宁
作者机构：
关键词： 长角血蜱;丝氨酸蛋白酶抑制剂-2;原核表达
期刊名称： 中国兽医学报
ISSN： 1005-4545
年卷期： 2009 年 29 卷 08 期
页码： 998-1002
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 根据GenBank中的长角血蜱丝氨酸蛋白酶抑制剂(Haemaphysalis longicornisserine proteinase inhibitor-2,HLS2)基因序列设计特异性引物,以长角血蜱饥饿成蜱总RNA为模板,经RT-PCR扩增出1 164 bp的HLS2DNA片段。将其与pET-30a载体连接,构建pET-30a-HLS2表达载体,转化J M109大肠杆菌,筛选阳性克隆,经双酶切鉴定及测序分析后转化到E.coliBL21(DE3)表达菌株中,经IPTG诱导后收集菌体进行SDS-PAGE电泳分析。优化表达条件后纯化融合蛋白,用Western blotting鉴定其抗原性。结果表明,获得的HLS2 DNA片段与GenBank中的HLS2(序列号AB162827)序列的同源性为98%。构建的pET-30a-HLS2表达载体在大肠杆菌中表达了约为47000的HLS2融合蛋白,主要以包涵体形式存在,IPTG终浓度为1.0 mmol/L、28℃诱导7 h后融合蛋白的表达量最高。Western blotting显示该融合蛋白可与兔抗长角血蜱阳性血清反应。
分类号： S852.23
- 相关文献
[1]长角血蜱MLP基因的克隆、表达及反应原性分析. 沈辉,柴慧萍,刘光远,田占成,谢俊仁,罗金. 2011
[2]长角血蜱酸性磷酸酶全长cDNA的克隆与原核表达及其表达产物的酶活性分析. 张萍,刘光远,田占成,谢俊仁,罗金. 2011
[3]长角血蜱隐性抗原基因HI05的克隆和原核表达. 张丽艳,刘光远,田占成,谢俊仁,龚真莉,刘建刚. 2009
[4]长角血蜱Septin-3的原核表达及其免疫分析. 车丽妍,王彦龙,张振杰,刘光远,关贵全,殷宏,任巧云,赵爱云,王国辉,张文霞,罗金,齐萌. 2024
[5]长角血蜱4D8基因的克隆与原核表达. 罗金,刘光远,田占成,谢俊仁,沈辉,田美媛. 2012
[6]长角血蜱新基因HL05全长序列的克隆与原核表达. 张丽艳,刘光远,田占成,谢俊仁,龚真莉,刘建刚. 2011
[7]长角血蜱MLC基因的原核表达及表达产物的免疫原性分析. 田美媛,田占成,谢俊仁,罗金,沈辉. 2012
[8]长角血蜱成年雌虫唾液腺cDNA表达文库的构建. 谢俊仁,田占成,李知新,刘光远. 2006
[9]中华泰勒虫(Theileriasinensis)媒介蜱的确定. 殷宏,刘光远,李有全,白启,马少祥,李世恩. 2004
[10]家兔抗长角血蜱免疫模型的建立及对长角血蜱成蜱生长发育的影响. 谢俊仁,刘光远,田占成,李知新,贾宁. 2008
[11]哒螨灵和高效氯氰菊酯对长角血蜱饱血雌蜱的毒力对比. 卢海燕,任巧云,李有全,李志,关贵全,殷宏. 2015
[12]长角血蜱卵泡抑素相关蛋白的定性. 田占成,刘光远,殷宏,罗建勋,谢俊仁. 2009
[13]长角血蜱饥饿雌蜱cDNA表达文库的免疫筛选与初步分析. 张丽艳,刘光远,田战成,谢俊仁,刘建刚. 2009
[14]长角血蜱雌蜱唾液腺cDNA表达文库的免疫筛选与初步分析. 刘光远,谢俊仁,田占成,李知新,龚真莉,王路,柴慧萍,才学鹏. 2008
[15]长角血蜱卵cDNA文库的构建. 李知新,田占成,谢俊仁,刘光远. 2006
[16]不同饲喂方式和温度对长角血蜱甘肃株生物学特性的影响. 李知新,刘光远,田占成,谢俊仁. 2010
[17]不同药物对三种蜱不同发育阶段杀灭效果的评价. 卢海燕,任巧云,陈泽,刘光远,殷宏,罗建勋,关贵全. 2017
[18]长角血蜱三种miRNAs在不同发育阶段和器官中的表达分析. 徐畅,王方方,龚海燕,曹杰,周勇志,张厚双,周金林,李国清. 2017
[19]长角血蜱卵泡抑素蛋白的初步定性. 田占成,刘光远,殷宏,罗建勋,谢俊仁. 2009
[20]长角血蜱天冬氨酸蛋白水解酶8基因的鉴定及其抵抗田鼠巴贝虫感染作用的研究. 朱昊天,周勇志,曹杰,王亚楠,张厚双,徐前明,周金林. 2024
作者其他论文 更多>>
-
天冬氨酸蛋白酶在卵形巴贝斯虫侵染长角血蜱过程中的作用研究
作者：罗金;张高峰;崔晶晶;柳志成;赵帅阳;任巧云;胡东生;曹立华;常国勤;殷宏;罗建勋;刘光远
关键词：长角血蜱;卵形巴贝斯虫;天冬氨酸蛋白酶;RNA干扰;RACE
-
基因Ⅰ型日本脑炎病毒NS1蛋白的多克隆抗体制备及鉴定
作者：柴风雪;田占成;杨吉飞;张鸿歌;牛庆丽;独军政;关贵全;殷宏
关键词：日本脑炎病毒;NS1蛋白;多克隆抗体;制备;鉴定
-
非洲马瘟病毒VP5蛋白在杆状病毒表达系统中的表达及其抗体制备
作者：范亚亚;王轩莹;户鑫兵;田占成;关贵全;罗建勋;殷宏;郑玉姝;独军政
关键词：非洲马瘟病毒;VP5蛋白;杆状病毒表达系统;多克隆抗体;免疫荧光
-
荧光素酶免疫吸附法高灵敏检测蓝舌病病毒抗体方法的建立
作者：张鸿歌;田占成;独军政;王琼洁;康棣;户鑫兵;张忠辉;关贵全;殷宏
关键词：蓝舌病病毒;VP7蛋白;荧光素酶免疫吸附试验;c-ELISA;血清学检测
-
非洲马瘟病毒NS1蛋白在昆虫细胞中的表达及抗原性分析
作者：户鑫兵;王轩莹;宋昱庆;田占成;关贵全;苟惠天;罗建勋;殷宏;独军政
关键词：非洲马瘟病毒;AHSVNS1蛋白;昆虫细胞表达;抗原性
-
稳转hTERT绵羊睾丸细胞系的建立
作者：杨雪;任善会;王相伟;龚真莉;殷相平;孙跃峰;陈豪泰;万学瑞
关键词：绵羊;睾丸原代细胞;人端粒酶逆转录酶基因;hTERT;永生化细胞系
-
长角血蜱Ykt6蛋白抗东方泰勒虫感染的生物学效应
作者：罗金;赵帅阳;车丽妍;严若锋;宋小凯;任巧云;关贵全;殷宏;刘光远;李祥瑞
关键词：长角血蜱;东方泰勒虫;Ykt6蛋白;感染;生物学效果
