文献类型： 中文期刊
第一作者： 户鑫兵
作者： 户鑫兵;王轩莹;宋昱庆;田占成;关贵全;苟惠天;罗建勋;殷宏;独军政
作者机构：
关键词： 非洲马瘟病毒;AHSVNS1蛋白;昆虫细胞表达;抗原性
期刊名称： 中国兽医科学
ISSN： 1673-4696
年卷期： 2024 年 54 卷 003 期
页码： 350-356
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 非洲马瘟(African horse sickness,AHS)是一种由媒介昆虫传播感染马属动物的病毒性疾病,为了在杆状病毒表达系统中表达AHSVNS1蛋白并评估其作为亚单位疫苗组分的抗原性,本研究参考GenBank上公布的AHSV基因序列,人工合成NS1全长基因序列,利用PCR方法扩增完整的开放阅读框后将其克隆到转座载体pFastBacTMHTb上,将成功构建的重组质粒pFastBac-AHSV NS1转化到DH10Bac感受态细胞中,获得了含有AHSV NS1基因的重组杆粒Bacmid-AHSV NS1,将其转染到Sf9昆虫细胞内获得了表达AHSV NS1蛋白的重组杆状病毒.SDS-PAGE和Western-blot结果显示,表达的重组AHSV NS1蛋白大小为65ku,且获得了纯化的重组AHSV NS1蛋白.将其免疫BALB/c小鼠,细胞免疫荧光和Western-blot试验显示获得了特异性的抗AHSV NS1蛋白多克隆抗体,其效价达1∶51 200.流式细胞分析显示,AHSV NS1蛋白免疫小鼠能够刺激CD4+和CD8+T淋巴细胞的增加.上述研究结果表明,AHSVNS1蛋白作为AHSV亚单位疫苗的组成成分具有一定应用前景.本试验实现了 AHSV NS1蛋白在昆虫细胞中成功表达并验证其具有良好的抗原性,这为进一步研究AHSVNS1蛋白的生物学功能和亚单位疫苗开发奠定了基础.
分类号： S852.659.4
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