柑橘香橙素生成途径关键酶黄烷酮-3-羟化酶特性分析及原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 黄旭

作者： 黄旭;田苗苗;肖妃垚;刘娟;王振;单杨

作者机构：

关键词： 柑橘;黄烷酮-3-羟化酶;生成途径;特征分析;原核表达

期刊名称： 食品科学技术学报

ISSN： 1671-1513

年卷期： 2021 年 002 期

页码： 65-72

摘要： 香橙素是柑橘类黄酮的重要组成,黄烷酮-3-羟化酶是香橙素生成途径中的关键作用酶。对黄烷酮-3-羟化酶的特点进行总结与分析并在大肠杆菌中进行表达。首先从NCBI数据库筛选了来自柑橘、陆地棉、玉米、水母雪莲和欧芹的5种f3h,对其进行理化性质、蛋白质二三级结构、序列比对等生物信息学分析并以大肠杆菌为宿主进行表达。发现5种来源的f3h,其基因开放阅读框为1 032～1 119 bp,编码343～372个氨基酸,蛋白分子质量为38.89～41.45 kDa,理论等电点在5.43～5.96,且不同物种F3H的理化性质、结构域和蛋白质结构也有一定的相似性。通过构建大肠杆菌表达体系发现:黄烷酮-3-羟化酶均能进行原核表达,除去来源于水母雪莲的F3H未检测到香橙素的生成,其余4种F3H均能将柚皮素转化为香橙素且产物生成量不同,其中ZmF3H生成量最高达20.12mg/L。

分类号： TS201.2

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