文献类型： 中文期刊
第一作者： 张旻
作者： 张旻;傅志强;林矫矫;洪炀
作者机构：
关键词： 日本血吸虫;带电多泡体蛋白5;转录水平;组织定位;免疫保护
期刊名称： 中国人兽共患病学报
ISSN： 1002-2694
年卷期： 2022 年 009 期
页码： 764-770
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 目的 克隆、表达日本血吸虫（Schistosoma japonicum,S.japonicum）带电多泡体蛋白5（CHMP5）,并对其生物学特性进行研究。方法 利用PCR扩增S.japonicum CHMP5基因目的片段，构建重组质粒pET28a（+）-CHMP5,并对该基因进行生物信息学分析。利用荧光定量PCR检测CHMP5在不同时期虫体中的转录水平。对体外表达的重组CHMP5蛋白进行纯化与质谱鉴定，并通过Western blotting检测其反应原性。利用免疫组化实验分析CHMP5在虫体中的分布。以小鼠为动物模型，评估重组CHMP5蛋白抗日本血吸虫病的免疫保护效果。结果 S.japonicum CHMP5的开放阅读框为675 bp,编码224个氨基酸，具有6个B细胞抗原表位；主要定位于S.japonicum虫体的体被上。CHMP5基因在35 d和42 d虫体中的转录水平高于其它检测时期，且42 d雌虫中的转录水平约是42 d雄虫的3倍。克隆表达的重组CHMP5蛋白其理论分子量约为29 kDa,具有较好的反应原性；用其免疫小鼠24 d,即可使小鼠产生较高水平的IgG抗体，并最终诱导产生18.96%的减虫率和42.98%的肝脏减卵率。结论 成功克隆、表达了S.japonicum体被蛋白CHMP5,其在不同发育时期虫体中均有表达，获得的重组CHMP5蛋白可诱导小鼠产生部分的免疫保护效果，为深入探讨S.japonicum CHMP5的生物学功能提供了基础。
分类号： R383.24
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