表达外源绿荧光蛋白的重组犬2型腺病毒的构建及其生物学特性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 周洁

作者： 周洁;姜骞;陈洪岩;胡建华;高诚;曲连东

作者机构：

关键词： E3区缺失;重组犬2型腺病毒;绿色荧光蛋白;生物学特性

期刊名称： 上海交通大学学报(农业科学版)

ISSN： 1671-9964

年卷期： 2010 年 28 卷 02 期

页码： 107-112

摘要： 以pUC18载体为骨架质粒,犬2型腺病毒(canine adenovirus 2,CAV-2)Toronto A26/61株为亲本毒株,以复制非必需区E3的侧翼序列为同源重组臂,对外源基因的插入靶点E3区进行了缺失,并在缺失位置插入hCMV IE启动子、多克隆位点,增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)、SV40早期转录poly-A信号,构建了E3区缺失的转移载体pUC-△E3-EGFP。该载体与CAV-2亲本毒株共转染MDCK细胞,二者发生同源重组,经蚀斑筛选获得了表达EGFP的重组病毒rCAV-2△E3-EGFP。经鉴定重组病毒保持了亲本毒株的生物学性状并能够稳定表达外源基因,动物试验证实E3区的缺失对病毒的致病力无明显影响,为进一步开展CAV-2活载体疫苗研制及相关基础研究提供了技术平台。

分类号： S852.655

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