口蹄疫病毒OH99株基因组全长cDNA的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘光清

作者： 刘光清;刘在新;谢庆阁

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;OH99株;全长cDNA

期刊名称： 中国兽医科技

ISSN： 1000-6419

年卷期： 2004 年 34 卷 08 期

页码：

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据口蹄疫病毒China99株的基因组序列 ,利用引物软件设计了 5对覆盖口蹄疫病毒OH99株基因组的重叠引物 ,从感染口蹄疫病毒OH99株的乳鼠胴体中提取了病毒基因组RNA ,采用RT PCR方法分别扩增了 5条基因片段 ,利用单一酶切位点 ,分别消化各扩增片段和pBluescriptSK +载体 ,在体外分别进行了 5′半分子和 3′半分子的构建。然后用人工合成基因法合成一段含有2 9个C 碱基的基因片段 ,利用两端的限制性内切酶位点 ,将该基因片段插入到 5′半分子中 ,最后将5′半分子和 3′半分子连接成基因组全长cDNA分子。经PCR鉴定及全长cDNA测序 ,分别扩增出了各基因片段 ,全基因组序列测定结果也与原来的测序结果一致 ,证实成功构建了口蹄疫病毒OH99株基因组全长cDNA分子

分类号： S852.65

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