米根霉糖化酶、类芽孢杆菌木聚糖酶融合蛋白的真核分泌表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王智

作者： 王智;宋立立;顾金刚;顿宝庆;田谷;路明;李桂英

作者机构：

关键词： 糖化酶;木聚糖酶;融合表达;毕赤酵母

期刊名称： 生物技术进展

ISSN： 2095-2341

年卷期： 2011 年 01 卷 04 期

页码： 276-281

摘要： 以米根霉(Rhizopus oryzae)3.866基因组DNA为模板,克隆得到糖化酶基因(glucoamylase gene,amyA),基因全长2049bp,编码604个氨基酸;以类芽孢杆菌(Paenibacillus sp.)H10-3基因组DNA为模板,克隆出基因木聚糖酶基因(xylanase A gene,xynA)的成熟肽编码序列,长636bp,编码211个氨基酸。通过重叠延伸PCR(SOE-PCR)得到拼接片段amyA-l-xynA,并将其克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9中,得到重组质粒pPIC9-amyA-l-xynA,重组质粒线性化后经电击转化到毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中,得到了表达成功的工程菌AX11。在AX11发酵上清液中同时检测到糖化酶活性(5.8U/mL)和木聚糖酶活性(32.3U/mL)。

分类号： Q78

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