具有绿色荧光标记的表达T7 RNA聚合酶的稳定细胞系的建立(英文)

文献类型： 中文期刊

第一作者： 宋玲玲

作者： 宋玲玲;李欣;王洪梅;高运东;王立群;仲跻峰;何洪彬

作者机构：

关键词： 绿色荧光标记;T7 RNAP;真核表达

期刊名称： Agricultural Science & Technology

ISSN： 1009-4229

年卷期： 2010 年 Z1 期

页码： 85-87+153

摘要： [目的]建立具有绿色荧光标记的表达T7RNA聚合酶的稳定细胞系。[方法]从BL21(DE3)大肠杆菌中克隆出T7RNAP基因,定向克隆进质粒FG12后,构建了表达T7RNA聚合酶基因(T7)的Lenti-virus重组质粒FG12-T7RNAP。用此重组质粒转染293T细胞,WB可检测出瞬时表达的T7RNAP蛋白;利用辅助质粒对表达T7的非复制型Lenti-virus病毒进行体外包装,所获得的非复制型Lenti-virus病毒感染BHK-21细胞,利用GFP通过流式细胞分选仪筛选表达T7的细胞系,并利用WB检测基因的表达。[结果]通过WB检测出不同代次的阳性细胞中均能稳定表达目的基因T7RNA聚合酶。[结论]T7RNA聚合酶能顺利在真核细胞内表达,并在此基础上建立的稳定细胞系为RNA病毒体内拯救技术平台的建立奠定了基础。

分类号： S188

  • 相关文献

[1]具有绿色荧光标记的表达T7 RNA聚合酶稳定细胞系的建立. 宋玲玲,李欣,王洪梅,高远东,王立群,仲跻峰,何洪彬. 2011

[2]pBBR1MCS2-Tac-EGFP广宿主载体适宜标记Ralstonia solanacearum. 肖熙鸥,林文秋,陈卓,邹春香,金辉,邹华芬. 2021

[3]猪视黄醇结合蛋白在毕赤酵母中的表达及检测. 张冬杰,谷溪,杨国伟,刘娣. 2009

[4]二化螟鞘磷脂合酶相关基因CsSMSr的克隆、真核表达及表达谱分析. 郑作林,周瀛,杨琼,巩中军,程家安,祝增荣. 2013

[5]生长抑素基因疫苗pES/2SS的构建与表达. 曹少先,何晓红,孙延鸣,刘铁铮,杨利国. 2007

[6]猪大肠杆菌LT基因位点突变、真核表达及小鼠免疫效果. 袁秀芳,王一成,徐丽华,刘邓,牛登元,王朝文. 2010

[7]岭南黄鸡肌生长抑制素基因成熟肽的克隆及酵母表达质粒的构建. 周红蕾,李春玲,王贵平,侯加法. 2008

[8]肝片吸虫GST真核表达载体构建及重组蛋白活性分析. 冉旭华,闻晓波,王春仁,刘娣,孙中武,李晓娟,王密. 2011

[9]抗菌肽SMAP-29在毕赤酵母中的表达. 任耀军,薄新文,王新华. 2008

[10]鸡β-防御素-1真核表达载体构建及其在Flp-In-293细胞中的表达. 单艳菊,胡艳,朱春红,束婧婷,丁晶,李慧芳,陈宽维. 2011

[11]日本乙型脑炎病毒NS3蛋白的真核表达及鉴定. 王双双,赵红梅,周丹娜,蔡行,耿超. 2019

[12]日本血吸虫谷胱甘肽-S-转移酶抗原表位与霍乱毒素B亚基融合蛋白在Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞的表达. 徐玉梅,曹士德,朱传刚,张世清. 2019

[13]卵泡抑素基因过表达对其通路上相关基因表达的影响. 孙亚蒙,张冬杰,张旭,汪亮,解宇,刘娣. 2013

[14]绵羊NICD基因的克隆、真核表达及其序列分析. 陈红玲,刘晨曦,孙亚伟,刘明军. 2014

[15]牛杀菌通透性增加蛋白N端在原核和真核细胞中的表达. 姚楠,白杰,张雪梅,吴卫东,李文蓉. 2012

[16]山羊Viperin基因的克隆与真核表达载体的构建. 李照耀,李文良,吴铖楠,李基棕,郝飞,毛立,周斌,江杰元. 2017

[17]日本乙型脑炎病毒NS5rdrp蛋白的真核表达及鉴定. 耿超,赵红梅,周丹娜,蔡行,王双双. 2019

[18]虎源犬瘟热病毒核酸疫苗构建及免疫原性初步研究. 张贺,翟少伦,罗满林,吕殿红,温肖会,魏文康. 2018

[19]鸭疫里氏杆菌OmpA基因真核表达载体构建及免疫效果初步评价. 余波,李婷,徐景峨,张亚楠,姜玲玲,周思旋,卜仕金. 2021

[20]猴源葡萄糖调节蛋白78生物信息学分析及其真核表达. 焦文强,刘运超,邢广旭,陈鹏举,徐引弟,王治方,张青娴,许峰. 2021

作者其他论文 更多>>

微信小程序