斑点叉尾鲴天然单链(ScFv)噬菌体抗体库的构建及初步鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王辉

作者： 王辉;邹世平

作者机构：

关键词： 斑点叉尾鲴;抗体库;噬菌体展示;抗体单链(ScFv)

期刊名称： 湖北农业科学

ISSN： 0439-8114

年卷期： 2011 年 50 卷 024 期

页码： 5239-5242,5249

收录情况： 北大核心

摘要： 以健康未经免疫的斑点叉尾鲴为试验材料,取其新鲜外周血,分离淋巴细胞,提取总RNA,逆转录合成cDNA.PCR扩增重链Fd和轻链cDNA,以纯化的VH、VL基因为模板,以与VH基因3'-端和VL基因-5'端序列互补的Linker-Primer Mix为引物,将VH、VL随机拼接为ScFv.通过酶切连接,依次将PCR产物插入质粒p3MH相应位点,热激法转化大肠杆菌XL1-Blue,加入辅助噬菌体VCSM 13,构建噬菌体单链抗体库.测定库容并酶切鉴定.斑点叉尾鲴天然单链(ScFv)噬菌体抗体库成功构建为进一步筛选特异性抗体及从斑点叉尾鲴病变组织中提取特异性抗原用于免疫治疗奠定了基础.

分类号： Q959.46+8

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