重组A型FMDV VP1基因减毒鼠伤寒沙门菌表达质粒的构建及表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李婧静

作者： 李婧静;潘丽;张中旺;张永光;吴润

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;VP1基因;减毒鼠伤寒沙门菌

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2016 年 06 期

页码： 678-683

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本试验通过构建重组A型FMDV VP1基因减毒鼠伤寒沙门菌,诱导产生外源蛋白,为减毒鼠伤寒沙门菌作为FMDV VP1口服活载体疫苗可行性提供研究基础。将A型FMDV VP1基因克隆后测序,根据减毒鼠伤寒沙门菌的密码子偏好性进行优化,再将其插入表达载体p YA3341之中构建重组质粒p YA3341-VP1。然后,将构建的重组质粒p YA3341-VP 1采用化学法转入大肠杆菌X6212中,筛选阳性克隆。经PCR鉴定和双酶切鉴定正确后,将重组质粒p YA3341-VP1依次转入减毒鼠伤寒沙门菌中间宿主X3730和表达宿主X4550中,在转入X4550后第3.5小时加入IPTG诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE与Western-blot分析。结果表明,成功构建了重组减毒沙门菌X4550-VP1载体,且表达产物大小为23 ku,与预期目的蛋白大小相符。上述结果表明,FMDV VP1基因在减毒鼠伤寒沙门菌中得到了成功表达。

分类号： S852.6

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