黑曲霉葡萄糖氧化酶基因的原核表达及其蛋白产物的Western-blot分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 安玉麟

作者： 安玉麟;孙瑞芬;张鹤龄;郭树春;闫素丽

作者机构：

关键词： 黑曲霉3.758;葡萄糖氧化酶基因;融合表达;抗血清;ELISA;Western-blot

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2009 年 24 卷 04 期

页码： 88-91

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为进一步研究黑曲酶中国株3.758葡萄糖氧化酶(GOD)在大肠杆菌中的表达水平和条件,将黑曲霉中国株3.758的葡萄糖氧化酶(GOD)基因定向克隆于原核表达载体pET-11a上,构建了融合表达的重组质粒pET/GO,转化E.coliBL21(DE3)plysS,用IPTG诱导,超声波粉碎细菌细胞,SDS-PAGE电泳检测,GOD基因获得了表达,表达的融合蛋白相对分子质量为66.5 kDa。用市售葡萄糖氧化酶免疫家兔获得抗血清,酶联法(ELISA)测定其效价为106,West-ern-blot分析证明表达的融合蛋白与兔抗GOD血清有较强的特异性,为黑曲霉3.758葡萄糖氧化酶(GOD)抗体的制备奠定了基础。

分类号： Q78

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