猪ACSM3基因过表达/敲减质粒的构建
文献类型: 中文期刊
第一作者: 张冬杰
作者: 张冬杰;柳樱子;汪亮;杨秀芹;刘娣
作者机构:
关键词: 猪;ACSM3基因;脂肪细胞;过表达;敲减
期刊名称: 安徽农业大学学报
ISSN: 1672-352X
年卷期: 2022 年 004 期
页码: 574-577
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 脂肪主要由甘油和脂肪酸组成,酰基辅酶A合成酶中链家族成员3(Acyl-CoA medium-chain synthetase3,ACSM3)是脂肪酸代谢第一步反应中的关键酶。为了深入研究ACSM3基因的生物学功能,采用克隆、测序、双酶切、连接等分子生物学技术,将ACSM3基因的完整编码区连入pcDNA3.1(+)载体内,构建该基因的过表达质粒;通过生物合成技术,构建该基因的敲减质粒。然后利用体外培养的猪前体脂肪细胞,检测ACSM3基因的过表达/敲减质粒的作用效果。结果表明,成功构建了ACSM3基因的过表达质粒,该质粒的过表达效果可一直持续到转染后的第8天。从3条特异性干扰序列中筛选出1条具有显著敲减效果的序列,敲减作用可持续到转染后的第2天。本研究所构建的过表达/敲减质粒,可为后续的ACSM3基因的功能研究提供有力的技术支持。
分类号: Q78%S828
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