微小牛蜱Bm86基因的克隆与原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 樊瑞泉

作者： 樊瑞泉;罗建勋;杨孝朴;殷宏;高金亮;关贵全;刘志杰;党志胜;马米玲;任巧云;刘爱红

作者机构：

关键词： 微小牛蜱;Bm86基因;克隆;表达

期刊名称： 甘肃农业大学学报

ISSN： 1003-4315

年卷期： 2007 年 42 卷 01 期

页码： 15-19

收录情况： CSCD

摘要： 根据已发表的Bm86基因序列,设计表达型引物,利用RT-PCR技术,从微小牛蜱饥饿幼蜱的研磨物中扩增Bm86基因,将PCR产物连入pGEM-T Easy载体,构建重组克隆载体pGEM-T easy-Bm86.测序分析表明:克隆的微小牛蜱Bm86基因序列与GenBank上登录的Bm86基因的核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为97%和95.6%.然后对重组克隆载体pGEM-T easy-Bm86进行双酶切,获得带有粘性末端的Bm86基因片段,并将此片段定向亚克隆入原核表达载体pGEX-4T-1,构建重组原核表达载体pGEX-4T-1-Bm86,将其转化到BL21宿主菌中,用IPTG进行诱导表达.SDS-PAGE检测表明表达产物为分子量为88 Ku的融合蛋白,目的蛋白约占蛋白总量的39%,表达量约为1.08 mg/mL.Western blot分析表明此表达产物能被兔抗微小牛蜱阳性血清所识别.

分类号： S852.7

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