乙型流感病毒TaqMan荧光定量PCR分型检测方法的建立及初步应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 赵文欣

作者： 赵文欣;朱翔宇;肖妍;韩继成;哈卓;张赫;谢宇飚;鲁会军;金宁一

作者机构：

关键词： 乙型流感病毒;TaqMan荧光定量PCR;血凝素

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2024 年 004 期

页码： 685-691

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过比对GISAID登录的乙型流感病毒Victoria谱系、Yamagata谱系HA基因序列，选择保守区域设计并合成1对引物及2条荧光探针，以实验室保存的乙型流感毒株RNA为模板分别扩增Victoria谱系和Yamagata谱系HA基因片段，构建重组质粒标准品pUC57-Vic和pUC57-Yama,经PCR及测序鉴定正确后作为质粒标准品，初步建立乙型流感病毒的TaqMan荧光定量PCR（real-time quantitative reverse transcription PCR,qRT-PCR）分型检测方法。结果显示，该方法可以特异的鉴别检测乙型流感Victoria谱系、Yamagata谱系病毒RNA,对甲型流感病毒、EB病毒、腺病毒等RNA/DNA的检测结果均为阴性；对重组质粒标准品的检测限分别为333、2 940拷贝/μL;批内与批间的重复性试验的变异系数均小于2%,表明所建立的检测方法特异性良好、灵敏度较高、重复性好；利用该方法与常规反转录PCR（RT-PCR）方法对10份流感样病例咽拭子进行检测，检测结果一致（3/10）。结果表明，本试验建立的乙型流感病毒TaqMan荧光定量PCR分型检测方法能够检测乙型流感病毒，为乙型流感病毒Victoria谱系及Yamagata谱系的鉴别提供更加快速准确的定量检测手段。

分类号： S852.65

  • 相关文献

[1]猪繁殖与呼吸综合征病毒类NADC30毒株与JXA1-R疫苗株荧光定量PCR鉴别检测方法的建立及应用. 周新宇,陈鑫鑫,乔松林,郭振华,李睿,邓瑞广,张改平. 2021

[2]鳜弹状病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及应用. 梁红茹,蔡秀珠,范芷仪,林强,付小哲,刘礼辉,黄志斌,牛银杰,林蠡,李宁求. 2019

[3]猪传染性胃肠炎病毒TaqMan荧光定量PCR方法的建立及在疫苗评价中的应用(英文). 俞正玉,徐向伟,孙冰,何孔旺,郭容利,杜露平,温立斌,张雪寒,茅爱华,倪艳秀,李彬. 2014

[4]猪圆环病毒Ⅱ型TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及应用. 郝立沙,张璐,佟杰,于颖,杨莹莹,张武超,涂亚斌,蔡雪辉. 2015

[5]基因Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用. 黄琦雯,王庆,王英英,李莹莹,石存斌,任燕,高彩霞,吴杰兴,郑树城,曾伟伟. 2017

[6]TaqMan实时荧光定量PCR检测毕赤酵母基因组中外源基因拷贝数. 李凯,高宏雷,高立,祁小乐,高玉龙,徐延伟,王笑梅. 2011

[7]猪流行性腹泻病毒TaqMan荧光定量PCR方法的建立与应用. 李彬,刘浩飞,孙冰,茅爱华,杜露平,何孔旺,郭容利,温立斌,张雪寒,倪艳秀,周俊明,吕立新,俞正玉,王小敏,胡屹屹,祝昊丹,于洋. 2014

[8]猪流行性乙型脑炎病毒TaqMan荧光定量PCR方法的建立. 霍红,李业南,薛遥,郭立平,王晓磊,步志高,华荣虹. 2014

[9]A型猪塞内卡病毒TaqMan荧光定量PCR方法的建立. 李秀博,刘存,鄢明华,崔玉东,崔尚金. 2019

[10]牛支原体和丝状支原体丝状亚种双重TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用. 马芷忻,武琪,刘桐,辛九庆,徐青元. 2024

[11]猪Hokovirus TaqMan荧光定量PCR方法的建立与应用. 李彬,杜露平,何孔旺,刘浩飞,温立斌,张雪寒,郭容利,茅爱华,倪艳秀,周俊明,吕立新,俞正玉,王小敏,胡屹屹,祝昊丹,于洋. 2013

[12]TaqMan荧光定量PCR检测滑液囊支原体方法的建立及其感染鸡血液内载量测定. 朱悦,祁晶晶,武梦思,张广冻,丁思羽,陈玥彤,高崧,于圣青. 2024

[13]斯里兰卡木薯花叶病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及应用. 黄境珊,王国芬,时涛,李超萍,陈奕鹏,蔡吉苗,李博勋,刘先宝,黄贵修. 2025

[14]H9N2亚型禽流感病毒华东分离株的生物学特性及遗传进化分析. 刘慧谋,吴培培,吴双. 2009

[15]中国鸭源H5N6 AIV血凝素和神经氨酸酶基因特征及遗传进化分析. 陈翠腾,万春和,陈珍,朱春华,傅光华,施少华,蔡国漳,刘斌琼,黄瑜. 2020

[16]季节性和大流行性H1N1流感血凝素DNA疫苗电穿孔免疫小鼠及攻毒保护实验. 谭磊,鲁会军,张丹,王开艳,田明尧. 2011

[17]加强禽流感诊断提高预防能力. 魏凤祥,周琦,张萍,叶喜永. 2001

[18]水禽源新城疫病毒HN糖蛋白在鸡体内演变. 丁铲,艾静,高勤学,陈鸿军,于圣青. 2007

[19]流感病毒的致病性与其血凝素裂解性及细胞蛋白酶的关系. 李海燕,毕英佐,于康震. 2000

[20]H5和H9亚型禽流感病毒反向斑点杂交同步检测法的建立. 王伟,薛强,邹明强,柴同杰,田甜. 2010

作者其他论文 更多>>

微信小程序