牛传染性鼻气管炎病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王倩颖

作者： 王倩颖;杨森;刘可欣;王超;孙飞雁;张淑琴

作者机构： 中国农业科学院特产研究所;黑龙江省农业科学院黑龙江农业科技杂志社

关键词： 牛传染性鼻气管炎病毒;检测方法;gD基因;实时荧光定量PCR

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2023 年 31 卷 006 期

页码： 140-145

收录情况： 北大核心

摘要： 为了建立牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的快速定量检测方法,本研究针对IBRV基因组gD序列保守区域设计特异性扩增引物,扩增的目的片段大小为105 bp,将其克隆至pMD18-T载体,构建重组质粒标准品pMD-gD-IBRV,优化反应体系后,建立了快速检测IBRV的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法.该方法特异性较强,与牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛冠状病毒(BCoV)、牛副流感病毒3型(BPIV3)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)均无交叉反应;敏感性试验结果显示,该方法敏感性高,对重组质粒标准品的最低检出限达4.8 × 100 copies/μL,高于常规PCR方法;批内、批间重复性试验的变异系数均小于2%,表明该方法重复性良好;该方法检测的样本阳性率高于常规PCR方法,利用该方法检测牛场送检的106份临床样品,结果显示IBRV的阳性率为36.7%,常规PCR检测方法检测显示阳性率为33.0%,二者符合率为96.2%,表明该方法更适用于临床样品检测.本研究建立的IBRV的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法特异性强、敏感性高、重复性好、快速高效,对于IBRV的检测和流行病学调查具有重要意义.

分类号： S852.65

  • 相关文献

[1]牛传染性鼻气管炎病毒SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法的建立. 刘占悝,刘泽余,李智杰,孙飞雁,郭利. 2020

[2]牛传染性鼻气管炎病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立. 刘占悝,刘泽余,李智杰,孙飞雁,郭利. 2020

[3]牛传染性鼻气管炎病毒JZ06-8株犊牛感染模型的建立. 李海涛,苗利光,朱言柱,肖佳美,刘艳环. 2015

[4]牛传染性鼻气管炎病毒gB基因荧光定量PCR检测方法建立. 王海军,王善辉,昌莉丽,陈鸿军. 2017

[5]番茄环纹斑点病毒(TZSV)实时荧光定量PCR检测方法的建立. 徐弢,郑雪,张晓林,陈永对,穆野,陈勇,郑宽瑜,赵立华,刘小烛,张洁. 2017

[6]中东呼吸综合征冠状病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立. 迟航,郑学星,盖微微,王翀,王化磊. 2014

[7]木尔坦棉花曲叶病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法. 赵蕊,吕利华,陈婷,何自福,何余容. 2015

[8]伪狂犬病毒Fa株gB、gC、gD基因的克隆与序列分析. 陈振海,林天龙,陈少莺,宋铁英. 2007

[9]猪伪狂犬病病毒山东分离株gE和gD基因的克隆及序列分析. 张玲玲,时建立,彭喆,徐胜男,郑书轩,吴晓燕,徐绍建,王金宝,李俊. 2017

[10]牛传染性鼻气管炎病毒SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立及应用. 任亚初,楚会萌,程凯慧,解晓莉,张亮,孙阳阳,杨美,杨宏军,唐月新,刘文浩,李开荣. 2019

[11]传染性喉气管炎病毒王岗株gB基因gC基因和gD基因的真核表达. 王利丽,王云峰,智海东,王玫,步志高,冉多良,童光志. 2005

[12]根癌农杆菌介导伪狂犬病毒gD基因转化玉米的研究. 胡建广,祁喜涛,杨承槐,娄高明. 2007

[13]牛传染性鼻气管炎病毒gD基因表达质粒免疫小鼠的试验研究. 李继昌,童光志,仇华吉. 2003

[14]猪伪狂犬病毒gD蛋白抗原表位的克隆及表达. 刘芳,张冲,王寅彪,赵朴,邓瑞广,李学伍. 2016

[15]浙江省猪伪狂犬病病毒分离及其gD和gE基因遗传变异分析. 谢荣辉,袁秀芳,王雅婷,安慧婷,董建斐,黄靖,张璐,徐辉,赵灵燕. 2022

[16]伪狂犬病毒gD基因转化马铃薯的初步研究. 舒曦,彭昶,王亚琴,胡建广. 2009

[17]鸡传染性喉气管炎病毒王岗株gC和gD基因的克隆及序列分析. 孟松树,郭鑫,张绍杰,王柳,仇华吉,王玫,童光志. 2000

[18]猫疱疹病毒1型HR-1毒株的分离鉴定及致病性分析. 刘晓晓,刘永相,张继凯,程晨曦,黄佳培,田进,曲连东. 2019

[19]生长抑素与伪狂犬病毒gD基因的质粒DNA可使猪增重并诱导出gD抗体. 李国新,仇华吉,韩成刚,韩凌霞,周艳君,陈艳,李继昌,童光志. 2005

[20]牛传染性鼻气管炎病毒PCR检测方法的建立. 林梅,缪德年,黄克和,张克春. 2015

作者其他论文 更多>>

微信小程序