水牛徒手克隆胚胎培养及冷冻条件的优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨春艳

作者： 杨春艳;庞春英;郑海英;黄芬香;王建;尚江华;杨炳壮;梁贤威

作者机构：

关键词： 水牛;HMC胚胎;培养;冷冻

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2012 年 39 卷 11 期

页码： 145-149

收录情况： 北大核心

摘要： 本试验利用微滴、微穴和平板培养系统对徒手克隆(hand-made clone,HMC)重组胚进行体外培养;采用了40%EG(ethylene glycol,EG)、25%EG+25%DMSO(dimethylsulphoxide,DMSO)和20%EG+20%DMSO+0.5mol/L蔗糖作为玻璃化冷冻液对HMC囊胚进行了超低温冷冻;并且比较了HMC与传统核移植的胚胎生产效率及囊胚冷冻存活率。结果表明,微穴系统的卵裂率要显著高于平板系统(P<0.05),极显著高于微滴系统(P<0.01);且微穴系统的囊胚率(40.0%)极显著高于平板(19.8%)和微滴系统(8.3%)(P<0.01)。采用20%EG+20%DMSO+0.5 mol/L蔗糖作为冷冻保护剂时HMC囊胚存活率极显著高于40%EG(P<0.01);HMC重组胚的融合率和囊胚率均高于传统核移植法(P<0.05;P<0.01),而HMC囊胚的冷冻存活率与传统核移植生产的囊胚没有显著差异。以上结果说明水牛HMC可以替代传统核移植法生产克隆胚胎,微穴体系最适合水牛HMC胚胎的体外培养,且采用20%EG+20%DMSO+0.5mol/L蔗糖对HMC囊胚进行玻璃化冷冻可以取得良好的冷冻效果。

分类号： Q813.7`S823

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