重组大肠杆菌产普鲁兰酶的高密度发酵工艺研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 乔宇

作者： 乔宇;丁宏标;闫俊艳;常敏

作者机构：

关键词： 高密度发酵;重组大肠杆菌;普鲁兰酶

期刊名称： 生物技术进展

ISSN： 2095-2341

年卷期： 2012 年 02 卷 03 期

页码： 195-200

摘要： 以表达普鲁兰酶的重组大肠杆菌作为出发菌株,在摇瓶培养的基础上,建立了大肠杆菌工程菌产普鲁兰酶的高密度发酵工艺。通过测定细胞密度、细胞干重、分离菌体可溶性成分与不溶性成分及SDS-PAGE电泳,分析重组大肠杆菌的生长和普鲁兰酶的表达情况。摇瓶试验使用合成培养基和LB培养基,重组大肠杆菌在合成培养基生长较慢,诱导5h的普鲁兰酶表达量高于LB培养基,包涵体比例低于LB培养基。重组大肠杆菌的高密度发酵使用合成培养基,补料阶段采用指数流加的工艺,在设定细胞的比生长速率为0.12的前提下,限制补料中碳源的供应,以阻止乙酸的产生。当细胞密度OD600达到70.0开始诱导,最终细胞密度为每升53.3g细胞干重,细胞内可溶性普鲁兰酶为每升1.35g。

分类号： TQ925

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