木薯钙调蛋白的原核表达及其单克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 欧文军

作者： 欧文军;余厚美;安飞飞;罗秀芹;秦于玲;陈松笔

作者机构：

关键词： 木薯;钙调蛋白;原核表达;单克隆抗体

期刊名称： 西北农业学报

ISSN： 1004-1389

年卷期： 2017 年 26 卷 09 期

页码： 1317-1323

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 钙调蛋白(CaM)作为重要的抗逆信号转导蛋白,在调控木薯抗逆境和块根采后生理腐烂中起重要作用,为给快速检测木薯在不同生长环境中CaM蛋白的表达水平提供优良抗体,克隆木薯CaM基因并将目的基因插入原核表达载体,经Escherichia coli表达并纯化,用纯化的融合蛋白ACP-CaM免疫Balb/C小鼠,间接ELISA测定小鼠血清效价后,取小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,筛选能产生抗CaM单克隆抗体的杂交瘤细胞株,用Western blot、ELISA等方法对制备的单克隆抗体进行初步鉴定。Western blot分析结果显示原核表达重组质粒在E.coli中能高效表达CaM,免疫小鼠后取效价高的2#小鼠脾细胞和SP2/0细胞融合,共获得7株效价均达到106以上、能稳定分泌抗CaM抗体的细胞株,这7株单抗与淀粉磷酸化酶、His、BSA均无交叉反应,4D5株与标签蛋白ACP有交叉反应,表明其余6株均为CaM特异性抗体;抗体亚型鉴定结果显示7株单抗均为IgG型抗体。

分类号： S533

  • 相关文献

[1]淀粉磷酸化酶原核表达及单克隆抗体的制备. 余厚美,安飞飞,罗秀芹,陈松笔,欧文军. 2017

[2]绿盲蝽核受体基因AlE75D的克隆和性质分析. 谭永安,赵旭东,肖留斌,孙洋,赵静,柏立新,郝德君. 2017

[3]抗鸡β干扰素单克隆抗体的制备及初步鉴定. 张向乐,孟春春,仇旭升,谭磊,宋翠萍,丁铲. 2013

[4]伪狂犬病毒gB基因的表达及单克隆抗体的制备. 邱佳,符芳,柴政,姜福成,田华彬,郎月坤,郑楠,李曦,张彦龙. 2014

[5]鸡LTBP1蛋白单克隆抗体的制备及鉴定. 滕蔓,迟佳琦,柴书军,罗俊. 2020

[6]鸡细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白p21单克隆抗体的制备. 李雪琪,连雪,鲍晨沂,孙海伟,陈鸿军,JUNG Yong-Sam,钱莺娟. 2017

[7]口蹄疫病毒非结构蛋白3D单克隆抗体的制备及鉴定. 田美娜,李永亮,卢曾军,付元芳,袁明,刘湘涛,刘在新. 2009

[8]鸭MAPK1蛋白的原核表达和单克隆抗体的制备. 曹守林,韩先干,王少辉,侯湾湾,田明星. 2014

[9]抗鹅星状病毒Cap蛋白单克隆抗体的制备及鉴定. 孙佳卉,刘志艺,黄聪,李传峰,刘光清,陈宗艳. 2021

[10]非洲猪瘟病毒pS273R蛋白水解酶单克隆抗体制备. 张萌,刘英楠,谢振华,敖清莹,吕璐,于婉琪,金文杰,秦爱建,扈荣良,陈鸿军. 2021

[11]鸭RIG-Ⅰ蛋白C端helicase结构域和RD结构域的原核表达及其单克隆抗体的制备. 臧凤霞,张雅春,王伟,赵颖慧,李越,周长良,陈洪岩,孟庆文. 2014

[12]非洲猪瘟病毒p22蛋白单克隆抗体的制备及鉴定. 矫健,李建达,韩先杰,张琳,张玉玉,任素芳,刘飞,陈智,Nataliia Hrabchenko,张文娟,于江,吴家强. 2023

[13]抗传染性法氏囊病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及鉴定. 黄远玲,黄聪,韩靖宜,韩先干,陈鸿军,陈宗艳,舒刚. 2024

[14]伪狂犬病病毒gE基因的表达及gE蛋白单克隆抗体的制备. 王淑杰,蔡雪辉,刘永刚,吴国军,刘狄萩,张琦,马平,李成君,石文达. 2007

[15]结核分枝杆菌rv3295基因的原核表达及单克隆抗体的制备. 崔莹莹,宋宁宁,党光辉,曹俊,李华芳. 2015

[16]新城疫病毒ClassⅠ强毒株L基因的表达及单克隆抗体的制备. 韦娜娜,于洋,陈鸿军,仇旭升,于圣青. 2012

[17]IBDV血清Ⅱ型VP5蛋白原核表达及型特异性单克隆抗体的制备. 秦立廷,祁小乐,高宏雷,高玉龙,王笑梅. 2009

[18]马立克病病毒Meq单克隆抗体的制备. 高俊娜,张幸星,连雪,孙海伟,郇文彬. 2016

[19]弓形虫GRA1基因的原核表达与鉴定. 韩阳瑞,蒋蔚,陈芸,薛俊欣,熊挺,龙梦瑶,凌娇,王权. 2019

[20]绵羊肺腺瘤病毒囊膜基因表面蛋白的表达及其单克隆抗体的制备. 刘霄卉,斯日古楞,罗军荣,周建华,马学恩. 2008

作者其他论文 更多>>

微信小程序