环形泰勒虫ETIF2β蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 石苗

作者： 石苗;李志;曹天行;刘爱红;马全英;关贵全;李有全;殷宏;罗建勋;刘军龙

作者机构：

关键词： 环形泰勒虫;ETIF2β蛋白;原核表达;多克隆抗体

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN：

年卷期： 2021 年 010 期

页码： 1253-1258

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究环形泰勒虫真核翻译起始因子2 beta （Theileria annulata eukaryotic translation initiation factor2 beta,ETIF2β）蛋白的功能,并制备其多克隆抗体,以环形泰勒虫裂殖体cDNA为模板,用PCR扩增ETIF2β基因片段。将ETIF2β基因片段与表达载体pET-30a（+）连接构建重组表达载体pET30a （+）-ETIF2β,经测序鉴定正确后,在大肠杆菌Rosetta（DE3）表达系统中表达。表达的蛋白纯化后用来免疫小鼠,制备特异性多克隆抗体。结果显示,PCR扩增的ETIF2β基因片段长约为723 bp,重组表达的ETIF2β蛋白的分子质量为38 ku。SDS-PAGE和Western-blot分析显示该蛋白主要以可溶性形式表达,并能与环形泰勒虫阳性血清发生特异性反应。用纯化的ETIF2β蛋白免疫小鼠获得了多克隆抗体,该抗体可与ETIF2β蛋白发生特异性反应。本研究成功表达了环形泰勒虫ETIF2β蛋白并制备了相应的多克隆抗体,为深入研究ETIF2β蛋白的功能奠定了基础。

分类号： S852.72

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