人分化抑制因子Id-3基因在大肠埃希氏菌中的高效表达及其多克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 林燕

作者： 林燕;童铁钢;穆丹梅;白宇;杨木蕾;郑敏;吴东来

作者机构：

关键词： 人分化抑制因子3(Id-3);表达;纯化;多克隆抗体

期刊名称： 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会论文集

ISSN：

年卷期： 2008 年

页码： 3

收录情况： CSCD

摘要： 从乳腺癌组织中提取总RNA,用RT-PCR扩增出Id-3的编码序列,克隆至表达载体pGEX-6P-1中,重组质粒经PCR、酶切、测序鉴定证明,Id-3基因已正确克隆至pGEX-6P-1中,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达,获得相对分子量为39000GST-Id-3融合蛋白,SDS-PAGE分析表达产物,Westernblot检测重组抗原的免疫原性。通过亲和层析法纯化表达的GST-Id-3融合蛋白,并以此为抗原制备多克隆抗体。ELISA和琼扩试验鉴定所制备的多克隆抗体可以与GST-Id-3融合蛋白发生特异性反应。Id-3基因在大肠杆菌中的成功表达及制备的多克隆抗体,为检测Id-3及其在各种组织中...

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