猪链球菌2型转录调控因子Rex原核表达及体外结合活性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王勇

作者： 王勇;祝昊丹;何孔旺;范红结

作者机构：

关键词： 猪链球菌;Rex;调控因子

期刊名称： 中国人兽共患病学报

ISSN： 1002-2694

年卷期： 2017 年 08 期

页码： 680-684

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的克隆猪链球菌2型转录调控因子Rex的编码基因进行原核表达和纯化,对其进行生物信息学分析和体外结合活性测定。方法 PCR扩增猪链球菌2型强毒株SS2-1的Rex基因编码区,将其克隆入pET28a质粒中,再将pET28aRex重组质粒转入大肠杆菌表达菌BL21(DE3)中,重组菌株经IPTG诱导后能表达出猪链球菌Rex蛋白;通过体外凝胶迁移实验(EMSA)对Rex蛋白与DNA的结合活性进行分析。结果成功地原核表达并纯化了Rex重组蛋白。Rex蛋白与自身启动子Prex特异性结合,高浓度的NADH抑制两者的结合活性,而NAD~+对结合没有影响。结论通过体外结合试验发现Rex是通过响应NADH/NAD~+平衡来调控自身基因的表达。

分类号： S852.611

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