利用SMART技术构建猪血管内皮细胞酵母双杂交cDNA文库

文献类型： 中文期刊

第一作者： 宋江伟

作者： 宋江伟;田宏;吴锦艳;陈妍;尚佑军;刘湘涛

作者机构：

关键词： 猪血管内皮细胞;cDNA文库;SMART技术

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2014 年 34 卷 06 期

页码： 865-868

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究旨在建立猪血管内皮细胞酵母双杂交cDNA文库,进而为研究猪瘟病毒的基因功能及致病机理提供良好的试验体系。体外培养猪血管内皮细胞,提取细胞总RNA,并用Oligotex mRNA Mini Kit纯化PolyA+mRNA,利用SMART技术合成双链cDNA(ds cDNA)。经CHROMA SPINTM TE-400Column纯化后的dsDNA与线性化的pGADT7-Rec共转化酵母感受态细胞Y187中,以同源重组的方式在酵母细胞内构建猪血管内皮细胞cDNA文库。结果获得的文库容量在6×106 CFU/mL,随机挑选24个克隆进行PCR检测,插入的片段大小集中在400~2 000bp之间,平均插入长度为1 000bp左右,文库重组率为100%。本研究为从文库中高通量地筛选出与猪瘟病毒互作的重组子,即寻找与该病毒相互作用的受体蛋白奠定了坚实的基础。

分类号： S858.28

  • 相关文献

[1]芜菁夜蛾斯氏线虫G26侵染期幼虫cDNA文库的构建及表达序列标签分析. 马娟,张军鸽,李秀花,李敏权,陈书龙. 2008

[2]Vero E6细胞酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定. 迟延彬,石达,朱庆贺,陈建飞,时洪艳,张鑫,李长龙,韩(敷),刘宁. 2014

[3]毒害艾美球虫孢子化卵囊cDNA文库的构建. 卞庆松,韩红玉,赵其平,姜连连,董辉,闫晓菲,张建哲,黄兵. 2008

[4]巨型艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA文库的构建. 张建哲,韩红玉,姜连连,董辉,赵其平,卞庆松,闫晓菲,黄兵. 2008

[5]利用SMART技术构建新吉细毛羊皮肤组织全长cDNA文库. 吴茜,田可川,刘武军,张艳花,吴伟伟. 2010

[6]VeroE6细胞酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定. 迟延彬,石达,朱庆贺,陈建飞,时洪艳,张鑫,李长龙,韩斅,刘宁,赵鑫,冯力. 2014

[7]柔嫩艾美耳球虫裂殖子全长cDNA文库的构建及应用. 王园园,陈佳,覃宗华,吴彩艳,廖申权,戚南山,吕敏娜,孙铭飞,蔡建平. 2012

[8]甘蓝花蕾酵母双杂交cDNA文库构建及评价. 胡轼林,雷蕾,王效维,颉建明,康俊根. 2015

[9]花生幼苗全长cDNA文库的构建. 禹山林,迟晓元,杨庆利,潘丽娟,和亚男,陈明娜,杨珍. 2010

[10]玉米籽粒酵母双杂交cDNA文库的构建及ZmSCL1互作因子筛选. 赵倩倩,周晓今,陈茹梅. 2017

[11]利用酵母双杂交系统筛选介体异沙叶蝉中与小麦矮缩病毒外壳蛋白互作的蛋白质. 刘艳,王锡锋. 2015

[12]低温诱导东乡野生稻幼苗期叶片cDNA文库的构建和鉴定. 邢俊杰,崔玲玲,韩小霞,阳志刚,李丁,谢灵灵,曹孟良. 2010

[13]穿山龙薯蓣皂甙次生代谢合成相关新基因的克隆和分析. 苟兴华,何明雄,孙雁霞,王跃华,苟小军. 2010

[14]干旱胁迫下耐旱稻中旱3号全长cDNA文库的构建. 刘运华,刘灶长,周立国,余舜武,刘鸿艳,罗利军. 2007

[15]干旱胁迫下耐早稻中早3号全长cDNA文库的构建. 刘运华,刘灶长,周立国,余舜武,刘鸿艳,罗利军. 2007

[16]花生茎全长cDNA文库的构建与分析. 邓烨,张冲,蔡铁城,熊发前,唐荣华,周双彪,庄伟建. 2014

[17]猪肾上皮细胞(PK-15)酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定. 李晓月,王春来,倪宏波. 2019

[18]木薯干旱胁迫下离区发育相关基因MeAP_(2-2)酵母单杂交文库构建及其上游调控基因的筛选. 廖文彬,李雅韵,杨义伶,王斌,彭明. 2015

[19]MeCWINV6酵母单杂交文库构建及其调控基因筛选. 郭育强,刘姣,符少萍,段瑞军,李瑞梅. 2016

[20]花生叶全长cDNA文库的构建和部分表达序列标签分析. 蔡铁城,张冲,邓烨,熊发前,唐荣华,周双彪,庄伟建. 2014

作者其他论文 更多>>

微信小程序