冬枣SRAP扩增体系的优化

文献类型: 中文期刊

第一作者: 杨丽丽

作者: 杨丽丽;吴明朝;巩檑;石磊;甘晓燕;宋玉霞

作者机构:

关键词: 冬枣;SRAP标记;正交设计;反应体系;优化

期刊名称: 西北农业学报

ISSN: 1004-1389

年卷期: 2013 年 22 卷 04 期

页码: 109-113

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 以冬枣为材料,采用正交设计L9(23)对SRAP-PCR反应体系的2个因素(dNTP浓度、Mg2+浓度)在3个水平上进行优化试验。在此基础上,比较不同Taq DNA聚合酶浓度和模板DNA用量对扩增效果的影响,最终建立适合冬枣SRAP扩增体系。结果表明,SRAP-PCR最佳反应体系为:在20μL总反应体系中,含Mg2+1.80mmol/L、dNTP 0.2mmol/L、Taq DNA聚合酶1.5U、模板DNA 60ng及引物0.5μmol/L。并运用5对引物对该体系的重复性和稳定性进行验证,使结果更加科学可靠。

分类号: S665.1

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