蓝舌病新疆分离株VP7蛋白编码基因序列分析及一步法RT-PCR方法的建立
文献类型: 中文期刊
第一作者: 马晓菁
作者: 马晓菁;谷文喜;叶锋;刘帅;刘丽娅;谢彩云;钟旗;易新萍
作者机构:
关键词: 蓝舌病;VP7蛋白;RT-PCR
期刊名称: 新疆农业科学
ISSN: 1001-4330
年卷期: 2024 年 001 期
页码: 253-259
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 【目的】分析蓝舌病新疆分离株编码VP7蛋白S7基因保守序列,建立蓝舌病新疆分离株一步法RT-PCR方法,为新疆BTV分子流行病学调查及防控提供技术支持。【方法】采用二代测序技术获得新疆分离株S7基因序列,登陆GenBank对序列进行同源性Blast比对,用软件MEGA 5.0分析序列差异,根据蓝舌病新疆分离株编码VP7蛋白S7基因保守序列,运用软件Oligo6.0设计引物,对蓝舌病新疆分离株S7基因进行RT-PCR扩增,并验证该方法的特异性及敏感性。【结果】蓝舌病中国新疆分离株编码VP7蛋白S7基因序列与哈尔滨报道BTV分离株S7基因片段相似度较高为89.64%,与中国云南报道BTV-29型分离株、蒙古国BTV分离株S7基因片段相似度分别为87.49%和87.39%;与德国BTV分离株S7基因片段相似度为80.70%,其余均无同源性序列。中国新疆分离株S7基因片段序列与4条同源序列间存在26处核苷酸差异,9处氨基酸差异。【结论】建立的蓝舌病中国新疆分离株S7基因片段一步法RT-PCR方法具有良好的特异性,仅BTV中国新疆分离株扩增获得目的条带,该方法的敏感性为4.0×103 copies/mL。
分类号: S852.65
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