猪IL-10 SYBR Green I Real-time PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 朱希旺

作者： 朱希旺;杜以军;李俊;陈智;于江;张玉玉;夏焱春;周明明;王金宝;吴家强

作者机构：

关键词： 猪;白介素-10;PRRSV;免疫抑制;Real-time PCR

期刊名称： 家畜生态学报

ISSN： 1673-1182

年卷期： 2014 年 08 期

页码： 13-17

收录情况： 北大核心

摘要： 白介素-10(IL-10)是一种具有免疫抑制作用的多能细胞因子。能够引发猪免疫抑制效应的多种病毒在感染宿主时均伴随有明显的IL-10上调,其中就包括猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),然而并不是所有的PRRSV毒株都能上调IL-10。为了详细探讨PRRSV免疫抑制与IL-10上调之间的关系以及PRRSV感染上调IL-10的具体分子机制,本研究针对猪IL-10以及看家基因β-actin的基因序列分别设计一对特异性引物,构建了各自含有IL-10、β-actin引物扩增序列的重组质粒为阳性标准品,建立了以2-△△Ct为基础的SYBR GreenⅠrealtime PCR检测方法。该方法线性关系良好;敏感性高,两种基因的检测下限均为1×101copies/μL;特异性强,扩增产物形成单一的特异性熔解峰;重复性良好,批内变异系数小于2%,批间变异系数小于3%;目的基因及内参基因的扩增效率较高,分别为92.7%、97.8%。综上所述,该方法可以用于猪IL-10mRNA水平的表达分析。

分类号： S858.28

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