家兔β干扰素启动子质粒的构建及其启动子活性鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈萌萌

作者： 陈萌萌;范志宇;胡波;宋艳华;魏后军;仇汝龙;朱伟峰;徐为中;王芳

作者机构：

关键词： 家兔;兔出血症病毒;IFN-β基因;启动子;荧光素酶;转录调控

期刊名称： 江苏农业科学

ISSN： 1002-1302

年卷期： 2019 年 23 期

页码： 78-81

摘要： 通过家兔体内感染兔出血症病毒(RHDV)后发现体内干扰素-β(Interferon-β,IFN-β)基因表达水平明显降低。为体外研究RHDV感染宿主后IFN-β启动子的调控机制,首先以家兔肝细胞总cDNA为模板,利用PCR扩增IFN-β基因启动子区的序列,经测序确定全长为550 bp;预测软件分析,与人源IFN-β基因启动子的转录上调区域(positive regulation domain,PRD)高度同源;随后将启动子全长和一系列转录元件克隆至pGL6-Basic荧光素酶表达载体中,成功构建重组体报告基因质粒后,瞬转RK-13细胞,利用试剂盒检测荧光素酶的相对活性。结果显示,克隆的IFN-β基因启动子区和AP-1、IRF3、NF-κB和IRF7等转录元件具有显著的活性,为研究兔出血症病毒对宿主IFN-β基因的转录调控机制提供了有效的工具。

分类号： S858.291

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