基于ERA-CRISPR/Cas12a-LFD的犀牛特异性检测技术

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王瑛

作者： 王瑛;张冲;蔡一村;王鑫杰;林颖峥;冯之航;潘良文

作者机构：

关键词： 犀牛源性成分;CRISPR/Cas12a;酶促重组等温扩增;侧向流试纸条

期刊名称： 野生动物学报

ISSN： 2310-1490

年卷期： 2023 年 44 卷 004 期

页码： 798-806

收录情况： 北大核心

摘要： 野生犀牛(Rhinocerotidae)种群的生存正面临极大威胁,包括栖息地减少、碎片化及偷猎等,在对打击犀牛角等非法贸易的努力中,物种的特异性检测至关重要,为了在现场就可以迅速完成犀牛源性成分鉴定,将酶促重组等温扩增(enzymatic recom-binase amplification,ERA)、CRISPR/Cas12a和侧向流试纸条(lateral flow dipstick,LFD)技术相结合,研发了一种适于现场使用的犀牛特异性核酸检测方法.结果表明:该方法只能检测出5种现生犀牛特异性核酸,与其他哺乳动物核酸测试样本没有交叉反应,最低检测下限可达100 拷贝/孔,具有较好的特异性和灵敏度.该方法可以在36.5~40.0℃条件下,27~30 min完成特异性识别,无需高规格的实验室环境和精密仪器,从而提供更快、更准确和更灵敏的检测方案.

分类号： Q953

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