高致病性PRRS VORF3基因在昆虫细胞中的表达与免疫原性研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 徐明明

作者： 徐明明;蔡雪辉;刘永刚;王淑杰;王洪峰;石文达;李丽琴;荣福龙

作者机构：

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;ORF3;杆状病毒表达;免疫原性

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2010 年 06 期

页码： 455-459

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为进一步研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP3的结构、功能和免疫学特性,本研究根据GenBank登录的高致病性PRRSV变异株(HP-PRRSV) HuN4株ORF3基因序列,经序列分析去除其N端的一部分疏水性区域(1aa～49aa),设计合成引物。将扩增的基因连接于pFastBac HTb杆状病毒载体中,构建重组质粒pF-ORF3,转化至感受态DH10Bac中,获得重组杆粒rBac-ORF3。再将其转染昆虫细胞Sf9,获得重组杆状病毒rAc-ORF3。用western blot和间接免疫荧光试验(IFA)分析表明GP3在昆虫细胞Sf9中获得正确表达,而且具有良好的反应活性。用纯化的GP3免疫小鼠,制备抗GP3多克隆抗血清,用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定其效价。本研究利用昆虫杆状病毒表达系统表达了重组GP3,经GP3免疫的小鼠体内产生了较高滴度的特异性抗体,证明表达的GP3具有特异的免疫原性。

分类号： S852.65

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