梅花鹿ColX基因的RNAi重组慢病毒载体的构建及鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 褚文辉

作者： 褚文辉;赵海平;杨福合;邢秀梅;李春义

作者机构：

关键词： 鹿茸;角柄;ColX基因;RNAi;慢病毒载体;微粒体培养

期刊名称： 2010中国鹿业进展

ISSN：

年卷期： 2010 年

页码： 6

收录情况： CSCD

摘要： 研究十型胶原蛋白(CollagentypeX,ColX),在软骨内成骨过程中所起的作用。本研究针对梅花鹿ColX基因设计筛选2条高分RNAi靶序列,在T4DNA连接酶的作用下分别与慢病毒载体质粒plvthm连接,形成重组质粒S2-plvthm/S3-plvthm;PCR筛选阳性克隆并测序鉴定。用Lipofectamine2000介导S2-plvthm/S3-plvthm,pCMVdr8.91,pMD2G三质粒共转染293T细胞。结果显示:转染24小时后,观察到表达荧光蛋白的293T细胞。收集培养液后进行1000克离心力离心5分钟,所得上清液含有重组慢病毒的组分。S2-plvthm/...

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