以马铃薯ND2 mRNA为内对照双重RT-PCR法检测马铃薯纺锤块茎类病毒

文献类型： 中文期刊

第一作者： 马恢

作者： 马恢;谢晓亮;尹江;温春秀;吴志明

作者机构：

关键词： 马铃薯;马铃薯纺锤块茎类病毒;双重RT-PCR;马铃薯线粒体NADH ND2 mRNA

期刊名称： 园艺学报

ISSN： 0513-353X

年卷期： 2007 年 34 卷 05 期

页码： 1213-1216

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)基因序列设计特异引物,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术进行PSTVd检测研究。为避免由于提取的RNA降解或者RT-PCR反应质量不高所造成的假阴性问题,在检测过程中引入马铃薯线粒体NADH脱氢酶ND2亚基基因mRNA为内对照,该内对照的一个引物跨越了该基因内含子区域,只对剪接后的mRNA进行特异扩增而不扩增其本身DNA。利用内对照引物和PSTVd特异引物进行双重RT-PCR检测,分别扩增出190 bp的内对照基因特异片段和360 bp的PSTVd特异条带,与预期引物设计大小一致。引入的内对照可以较好地监控PSTVd的RT-PCR检测过程。

分类号： S435.32

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