鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白FliC的原核表达、纯化及其多克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈明

作者： 陈明;徐幸莲;周光宏;汤晓艳;袁飞;陈爱亮

作者机构：

关键词： 鼠伤寒沙门氏菌;鞭毛蛋白FliC;原核表达;纯化;鉴定;多克隆抗体

期刊名称： 食品科学

ISSN： 1002-6630

年卷期： 2013 年 34 卷 009 期

页码： 180-184

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用PCR扩增出鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白基因fliC,连接到原核表达载体pET28a(+)上,测序鉴定后转化至大肠杆菌BL21(DE3)pLysS感受态细胞中,构建了原核表达系统.经1mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导及Ni-NTA纯化后,得到了带6*His纯化标签的分子质量大小约为54.6kD的表达产物,和预测蛋白大小一致,且大部分表达产物以可溶形式存在利用Western-blotting进一步鉴定,结果表明,该蛋白能与抗His标签的单抗发生特异性反应.用纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,获得多克隆抗体,并对抗血清的效价和特异性进行检测,结果表明,多抗的效价较高,特异性较好.

分类号： R378

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