流产布氏杆菌rfbD基因缺失株的构建及其生物学特性

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张敏

作者： 张敏;韩先干;田明星;单雪芹;宋军

作者机构：

关键词： 布氏杆菌;rfbD基因;缺失株

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2013 年 05 期

页码： 446-452

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了研究流产布氏杆菌rfbD基因缺失株的生物学特性和毒性变化,采用同源重组的方法构建该缺失株。以pDS132质粒为模板扩增sacB片段,通过NdeⅠ酶切位点,用T4连接酶将sacB片段与pUC19质粒连接,获得自杀质粒SacB-pUC19;用重组PCR方法扩增rfbD ORF内缺失668bp的缺失突变核,通过PstⅠ、SmaⅠ酶切位点,用T4连接酶将ΔrfbD缺失突变核与自杀质粒SacB-pUC19连接,获得突变载体SacB-pUC19-ΔrfbD;将SacB-pUC19-ΔrfbD电转化至流产布氏杆菌S2308感受态细胞中,运用sacB反向筛选构建流产布氏杆菌S2308 rfbD无痕突变株,并分析其在巨噬细胞RAW264.7和BALB/c小鼠体内的存活能力。结果显示,成功构建了流产布氏杆菌S2308 rfbD基因缺失株,该突变株在巨噬细胞和小鼠体内毒力减弱,存活能力下降,证明rfbD基因是流产布氏杆菌的毒力相关基因。

分类号： S852.61

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