空肠弯曲杆菌和结肠弯曲杆菌双重PCR鉴别检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 孙久鹤

作者： 孙久鹤;郭东春;李安;刘家森;刘春国

作者机构：

关键词： 空肠弯曲杆菌;结肠弯曲杆菌;双重PCR;hipO基因;cdtC基因

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2016 年 01 期

页码： 64-68

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为快速检测和鉴定空肠弯曲杆菌和结肠弯曲杆菌,本研究设计并合成了空肠弯曲杆菌马尿酸酶基因hipO和结肠弯曲杆菌cdtC基因的2对特异性引物,建立并优化了快速检测空肠弯曲杆菌和结肠弯曲杆菌的双重PCR方法。结果显示,双重PCR对空肠弯曲杆菌hipO基因和结肠弯曲杆菌cdtC基因的扩增产物的大小分别为653bp和313bp。PCR扩增条件最终确定为退火温度为52℃,dNTP终浓度为0.4mmol/L,hipO和cdtC基因引物的终浓度均为2 5μmol/L。该双重PCR的灵敏度可达到6.6 8×1 0-2μg/mL,对多杀性巴氏杆菌、产单核细胞李氏杆菌、产气荚膜梭菌、伤寒沙门菌和金黄色葡萄球菌扩增均无目的条带,说明该PCR方法具有良好的灵敏性和特异性。符合试验结果与单一PCR方法结果相同。用所建立的方法对本实验室采集的鸡肛拭子划线培养后的可疑菌落进行PCR鉴定,结果显示2株为空肠弯曲杆菌,2株为结肠弯曲杆菌。结果表明,本研究建立的双重PCR可以用于同时检测空肠弯曲杆菌和结肠弯曲杆菌。

分类号： S852.61

  • 相关文献

[1]江苏省225株鸡源弯曲杆菌分离株的MLST分析. 陈文芳,唐梦君,周倩,张小燕,唐修君,陆俊贤. 2022

[2]宁德地区鸡场空肠弯曲杆菌调查与耐药性分析. 常江,张玲,代正云,夏效东,杨华,唐标. 2020

[3]空肠弯曲杆菌ERIC-PCR分型技术研究. 唐梦君,高玉时,张小燕,陆俊贤,施祖灏,唐修君,陈大伟. 2013

[4]空肠弯曲杆菌LAMP检测方法的建立及初步应用. 唐梦君,周生,张小燕,唐修君,顾荣,高玉时. 2012

[5]空肠弯曲杆菌PCR-ELISA检测方法的建立. 唐梦君,周生,张小燕,唐修君,蒲俊华,高玉时. 2013

[6]空肠弯曲杆菌感染对鸡胚肠上皮细胞TLR1和TLR15 mRNA转录水平的影响. 唐梦君,张小燕,唐修君,张静,蒲俊华,葛庆联,高玉时. 2014

[7]江苏省禽源空肠弯曲杆菌的分离鉴定及耐药性研究. 周倩,唐梦君,张小燕,张静,唐修君,顾荣,刘茵茵,高玉时. 2017

[8]双重PCR方法检测检疫性细菌洋葱腐烂病菌和菊基腐病菌. 杨万风,刘艳,陆辰晨,邵沛泽,谌运清,赵文军. 2018

[9]双重PCR法同步检测菜豆晕疫病菌和萎蔫病菌. 杨万风,刘艳,刘翔,邵沛泽,谌运清,赵文军. 2015

[10]双重PCR快速鉴别无乳链球菌和海豚链球菌. 黎炯,叶星,卢迈新,邓国成,田园园,江小燕,黎坚平. 2010

[11]羊源肠球菌属与屎肠球菌双重PCR检测方法的建立. 刘昆,凤英,高娃,杨斌,张月梅,宋越,陈伟,吴树清,赵世华. 2015

[12]绵羊肺炎支原体和山羊伪结核棒状杆菌双重PCR检测方法的建立及应用. 黄丽丽,林裕胜,肖义军,胡奇林. 2020

[13]鸡毒支原体与鸡滑液囊支原体双重PCR检测方法的建立. 杨斌,朝洛门,陈志鹏,苏日娜,张月梅,宋越,萨娜,萨日盖,萨茹丽,赵世华. 2019

[14]牛诺如病毒及牛嵴病毒双重PCR检测方法的建立及初步应用. 师志海,徐照学,兰亚莉,王文佳. 2020

[15]气单胞菌和嗜水气单胞菌双重PCR检测方法的建立. 潘晓艺,沈锦玉,郝贵杰,姚嘉贇,徐洋,尹文林,孙逢明,吴颖蕾. 2011

[16]马铃薯腐烂茎线虫特异性分子检测技术研究. 彭德良,杨玉文,何月秋. 2008

[17]双重PCR检测马铃薯晚疫病菌和青枯病菌方法的建立及应用. 陈庆河,李本金,兰成忠,赵健,邱荣洲,翁启勇. 2009

[18]香蕉穿孔线虫(Radopholus similis)特异性分子检测技术研究. 耿丽凤,张东升,彭德良. 2011

[19]鳜弹状病毒与传染性脾肾坏死病毒双重PCR检测方法的建立. 梁红茹,范芷仪,蔡秀珠,付小哲,林强,刘礼辉,黄志斌,牛银杰,林蠡,李宁求. 2020

[20]香蕉穿孔线虫(Radopholussimilis)特异性分子检测技术研究. 耿丽凤,张东升,彭德良. 2011

作者其他论文 更多>>

微信小程序