非洲猪瘟病毒VP73基因主要抗原表位区的融合原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李秋霞

作者： 李秋霞;滕达;童德文;杨雅麟;田子罡;王建华

作者机构：

关键词： 非洲猪瘟病毒;VP73基因;主要抗原表位区;表达

期刊名称： 中国生物工程杂志

ISSN： 1671-8135

年卷期： 2010 年 30 卷 02 期

页码： 60-65

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 人工合成VP73基因全长序列,利用DNAstar软件确定其中抗原性较高的区域,利用Primer Premier5.0设计一对特异性引物,通过PCR扩增得到243bp的非洲猪瘟病毒VP73基因片段(vp73l)。将该片段与表达载体pET-32a连接克隆至大肠杆菌Escherichia coli(E.coli)DH5α菌株,经测序、菌落PCR和酶切鉴定,选取VP73L基因正向插入,读码框正确的阳性克隆。构建重组质粒并转化BL21(DE3),经IPTG诱导,融合蛋白以可溶性形式在E.coliBL21(DE3)高效表达,经His亲和层析柱得以纯化。Western blotting显示,该融合蛋白能与兔抗非洲猪瘟病毒VP73多克隆抗体发生特异性反应。所得结果为进一步研究:分离纯化该重组融合蛋白;确证目标抗原蛋白VP73L免疫原性及其特异性,进而达到建立非洲猪瘟病毒的免疫检测方法奠定了必要的材料与技术基础。

分类号： S854.43

  • 相关文献

[1]非洲猪瘟及防控技术研究现状. 扈荣良,于婉琪,陈腾. 2019

[2]非洲猪瘟病毒PCR检测方法的建立. 李云灿,胡剑武,赵俊龙,李家奎. 2021

[3]非洲猪瘟病毒p72蛋白N末端的原核表达及间接ELISA检测方法的建立. 姜林林,宋帅,蔡汝健,蒋智勇,李艳,勾红潮,楚品品,李春玲. 2021

[4]非洲猪瘟病毒锁核酸探针荧光定量PCR检测方法的建立. 李艳,郭怡德,勾红潮,卞志标,孙铭飞,蔡汝健,宋帅,蒋智勇,楚品品,徐民生,杨东霞,李春玲. 2021

[5]非洲猪瘟病毒结构蛋白基因重组痘苗病毒的构建及鉴定. 张会雷,刘任强,张敏敏,王喜军,葛金英,温志远,步志高. 2017

[6]非洲猪瘟病毒蛋白功能研究进展. 郭怡德,李冰,蔡汝健,蒋智勇,宋帅,勾红潮,李艳,楚品品,杨冬霞,卞志标,李春玲,臧莹安. 2020

[7]非洲猪瘟病毒的基因特征. 谢春芳,于瑞嵩,董世娟,陈冰清. 2020

[8]非洲猪瘟病毒多表位融合蛋白P72的构建、表达及免疫学特性研究. 郭晶,李重阳,孟庆玲,乔军,伍晔晖,王立霞,马帅,才学鹏. 2019

[9]非洲猪瘟病毒荧光定量PCR的建立及4种检测试剂盒的比较. 肖琦,蒋彩霞,史慧,赵霞玲,钱雯娴,朱家平,张冯禧,温立斌,汪伟,何孔旺. 2021

[10]非洲猪瘟病毒的免疫逃逸策略. 孙茂文,王涛,孙元,杨玉莹,仇华吉. 2021

[11]MicroRNA在非洲猪瘟研究中的应用. 张兆博,张思诗,汉可欣,李晓易,文雪霞,汉丽梅. 2021

[12]非洲猪瘟病毒p30蛋白的真核表达纯化及单克隆抗体的制备. 刘靖,钟杰,陈伟业,王晗,张经伟,步志高,华荣虹. 2021

[13]非洲猪瘟病毒荧光定量PCR检测方法的建立. 余斌,徐丽华,李军星,苏菲,叶十一,袁秀芳. 2023

[14]半固体培养法制备非洲猪瘟病毒pA104R蛋白的单克隆抗体. 刘蓓蓓,韦艳娜,陈蓉,谢星,倪博,郝飞,张珍珍,白昀,袁厅,冯志新. 2024

[15]非洲猪瘟病毒D1133L蛋白增加宿主波形蛋白磷酸化而促进病毒在猪巨噬细胞中的复制. 陈玲玲,张婷,郝雨,杨金柯,史喜绢,张大俊,杨行,赵登率,闫文倩,别鑫恬,陈国辉,郑海学,乐涛,张克山. 2024

[16]非洲猪瘟病毒p30蛋白在本氏烟草中的表达及其抗体间接ELISA检测方法的建立. 刘悦,魏天,张春雨,张建峰,王成宇,张芳毓,朱日宁,鞠安琪,王思月,曲磊,张守峰,扈荣良,梁静,王永志. 2024

[17]口蹄疫病毒与非洲猪瘟病毒的比较. 李冬. 2020

[18]非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体制备及线性抗原表位定位. 魏天,王成宇,王凤杰,李忠鹏,张芳毓,张守峰,扈荣良,吕礼良,王永志. 2022

[19]非洲猪瘟病毒pS273R蛋白水解酶单克隆抗体制备. 张萌,刘英楠,谢振华,敖清莹,吕璐,于婉琪,金文杰,秦爱建,扈荣良,陈鸿军. 2021

[20]非洲猪瘟病毒的分子病原学及致病机理研究进展. 欧云文,阎传忠,张杰,马炳,代军飞,张永光,贾宁. 2017

作者其他论文 更多>>

微信小程序