检测犬免疫球蛋白G的夹心ELISA方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王正阳

作者： 王正阳;刘平黄;梁琳;陈建飞;吕世明;崔尚金

作者机构：

关键词： 犬免疫球蛋白G;双抗体夹心ELISA;反应条件;检测

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2016 年 38 卷 02 期

页码： 142-145

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立犬免疫球蛋白G(Ig G)的检测方法,本研究以兔抗犬Ig G Fc段多克隆抗体为包被抗体,过氧化酶标记的兔抗犬Ig G(全分子)多克隆抗体为检测抗体,建立了双抗体夹心ELISA定量检测方法,并采用Protein A方法从犬血清中纯化犬Ig G作为ELISA检测标准品。该检测方法与小鼠、兔、马、牛、鸡及羊常见动物血清均无交叉反应,特异性好;最低检测下限可以达到4.8 ng/m L,敏感性较高。以本研究建立的ELISA方法检测犬细小阳性血清和阴性血清,阳性血清Ig G含量明显高于阴性血清;检测转染犬源化抗体序列重组质粒的细胞培养液上清,重组质粒在96 h表达量达到峰值。本研究为进一步建立稳定表达犬源化抗体的细胞系提供了特异性的定量检测方法。

分类号： S852.4

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