Asia1型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA方法的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 梁伟峰

作者: 梁伟峰;周国辉;刘文铭;李超斯;刘云;于力

作者机构:

关键词: Asia1型口蹄疫病毒;单克隆抗体;双抗体夹心ELISA

期刊名称: 中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2016 年 38 卷 03 期

页码: 226-229

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为建立Asia1型口蹄疫(FMD)快速病原学诊断方法,本研究采用纯化的Asia1型口蹄疫病毒(FMDV)免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合并筛选到一株能够稳定分泌抗Asia l型FMDV单克隆抗体(MAb)2E10。经间接免疫荧光试验特异性鉴定,2E10为FMDV型特异型MAb。其抗体亚类为Ig G1/资,杂交瘤细胞上清和腹水抗体效价分别为1颐256和1颐104,相对亲和力常数为2.5 mol/L。在此基础上,以本实验室前期制备的MAb 2D8为包被抗体,以HRP标记的MAb 2E10为检测抗体建立了检测Asia1型FMDV抗原的双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)方法。该方法针对FMDV细胞毒的最低检出量为103TCID50,对O型FMDV、A型FMDV、牛肠道病毒、牛呼肠孤病毒及牛传染性鼻气管炎病毒检测结果均为阴性。本研究建立的Asia1型FMDV DAS-ELISA方法为Asia1型FMD病原学诊断试剂盒的研发奠定了基础。

分类号: S855.3

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