结核分支杆菌MPT83在真核、原核表达载体中的克隆、表达与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 田霞

作者： 田霞;呼西旦;潘怡;朱玉贤;蔡宏

作者机构：

关键词： 结核分支杆菌;免疫原性蛋白MPT83;SDS-PAGE;胶;Western blotting

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2003 年 24 卷 04 期

页码： 70-73

摘要： 为了克隆、鉴定和表达结核分支杆菌抗原蛋白 MPT83 ,为结核病的诊断以及亚单位疫苗、核酸疫苗的制备和应用奠定基础。以结核分支杆菌标准菌株 H3 7RV基因组 DNA为模板 ,PCR扩增目的基因 mpt83 ,扩增产物酶切后分别克隆到真核、原核表达载体 p JW43 0 3和p ET2 2 b( +)中 ,构成重组真、原核表达载体 83eu和 MPT83。经酶切和序列鉴定为正确的重组真核表达载体 83 eu和重组原核表达载体MPT83 ,分别转染 COS7细胞和转化 BL2 1( DE3 ) plys S。结果表明 ,经 SDS-PAGE、Westernblotting检测显示 ,IPTG诱导的原核表达载体MPT83在 2 .6万处有正确而特异的蛋白条带 ;转染 COS7细胞的真核表达载体 83 eu,Westernblotting检测表明也有与结核分支杆菌抗血清特异反应的蛋白条带

分类号： R346

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